中性粒细胞为主型尘螨过敏哮喘小鼠模型的建立

发布时间：2021-08-15 02:28

　　目的使用屋尘螨提取物（HDM）建立中性粒细胞为主型小鼠哮喘模型。方法按照随机数字表法,将16只无特定病原体（SPF）级BALB/c小鼠分为对照组和模型组。模型组给予HDM滴鼻致敏及激发,对照组小鼠给予等量生理盐水。末次激发后24 h,采用BUXCO小鼠无创肺功能仪测量气道呼气间歇（Penh）值确定气道阻力,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）计数细胞数并进行炎细胞分类, HE染色观察肺组织炎细胞浸润程度。实时定量PCR检测白细胞介素6（IL-6）、 IL-17F、 IL-1βmRNA表达,微量样本多指标流式蛋白定量技术（CBA）检测BALF中IL-4、 IL-6、 IL-17F、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。结果与对照组相比,模型组Penh值明显升高,气管及血管旁炎症比对照组明显加重;模型组小鼠IL-6、 IL-17F、 IL-1βmRNA水平增加, BALF细胞数及中性粒细胞数明显增加, BALF中促中性粒细胞型细胞因子IL-6、 IL-17F、 TNF-α水平明显升高。结论成功建立了中性粒细胞为主型尘螨过敏小鼠哮喘模型。 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2020,36(08)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

哮喘模型造模方法

末次激发后24 h检测气道阻力, 采用(0、 3.125、 6.25、 12.5、 25、 50)mg/mL Ach激发, BUXCO 小鼠无创肺功能仪测量对应的Penh值。小鼠放入腔体适应5 min, 雾化相应剂量Ach 2 min, 记录数据3 min, 休息1 min, 所得每组各剂量数据取平均值。对照组和模型组Penh值随Ach剂量升高而逐渐升高, 模型组Ach的剂量从3.125 mg/mL至50 mg/mL 升高的幅度明显大于对照组, 差异具有统计学意义(P<0.05, 图2), 说明模型组小鼠气道阻力明显增加。2.2 BALF总细胞数和中性粒细胞和嗜酸性粒细胞百分比明显增加

将制备好的切片放入一般光学显微镜400倍下观察, 可见模型组小鼠气管及血管旁有大量炎性细胞浸润, 以中性粒细胞、 嗜酸性粒细胞、 单核细胞为主; 可见支气管黏膜皱襞延长增多, 平滑肌增厚, 部分管腔缩窄伴炎细胞和液体渗出。部分肺泡破裂融合。对照组气管及血管旁未见明显炎细胞浸润, 未见平滑肌增生, 肺泡正常(图4)。2.4 模型组小鼠肺组织IL-6、 IL-1β、 IL-17F mRNA水平增加

【参考文献】：
期刊论文
[1]模拟临床的中性粒细胞性激素抵抗型支气管哮喘小鼠模型的建立及意义[J]. 王楠,陈子,葛林阳,王曦,高蕾,李涛,胡蓉,张明顺,周林福.  中华结核和呼吸杂志. 2020(01)
[2]Effect of Gubenfangxiao decoction on respiratory syncytial virus-induced asthma and expression of asthma susceptibility gene orosomucoid 1-like protein 3 in mice[J]. Huang Zhengguang,Gao Lijuan,Zhao Xia,Ling Hao,Chen Wenjun.  Journal of Traditional Chinese Medicine. 2016(01)
[3]屋尘螨提取液在BALB/c小鼠气道炎症中的作用[J]. 赵敏,范秋淋,孙奋勇,陈春球,李智.  同济大学学报(医学版). 2015(01)



本文编号：3343657