小鼠sIL-13Rα2的原核表达、纯化与鉴定

发布时间：2021-08-17 03:16

　　哮喘是多种细胞参与的慢性气道过敏性炎症。Th2型细胞因子IL-13在炎症反应过程中起关键作用。它可引起多种哮喘病理学变化,包括气道高反应性、肺部Eos增多、粘液分泌增加、IgE合成增多以及纤维化。在小鼠哮喘模型中,IL-13Rα2-Fc或抗IL-13单抗可有效抑制以上哮喘病理变化。一些抗IL-13单抗正处于临床前期试验阶段,最终临床效果尚待证实,但大量临床前试验数据显示IL-13阻断剂有望成为治疗哮喘的新药物。IL-13Rα2是个诱饵受体,可以阻断IL-13与IL-13Rα1/IL-4Rα结合,从而阻断IL-13的生物活性。可溶性IL-13Rα2（sIL-13Rα2）可有效拮抗其细胞因子,无单抗的异种免疫源性,对机体刺激反应小。目前未见sIL-13Rα2治疗哮喘的研究。国外研究人员已经在大肠杆菌表达系统中成功表达了重组狗IL-13Rα2-Fc（rcaIL-13Rα2-Fc）和重组狗IL-13Rα2（rcaIL-13Rα2）。本研究拟利用大肠杆菌表达系统表达sIL-13Rα2,为研究其治疗哮喘奠定基础。目的:在大肠杆菌中表达具有生物学活性的sIL-13Rα2。方法:将sIL-13Rα2基... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

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Th2细胞与哮喘发病机制目前研究IL-13与哮喘发病和病理改变比较多

第四军医大学硕士学位论文IL-13Rα1 链和IL-4Rα链组成的受体复合物来调节其生物学作用。它由 4 个α螺旋构成，C末端的D螺旋包含能与IL-13Ra1 和IL-13Rα2 相互作用残基，然而A和C螺旋主要在IL-13与IL-4Rα相互反应中作用（41，42）。近来研究发现由IL-4或IL-13 与IL-13Rα1 和IL-4Rα链组成的三元络合物晶体状结构，通过分析这种晶体结构可了解不同细胞因子与共同受体链之间的相互作用，有助于解释在IL-4和IL-13刺激下，细胞产生不同的亲和力和效能（43）。IL-13Rα2和IL-4Rα相互作用调节的机理仍需进一步的研究。

ROEX HT a结构示意图法 重组表达质粒 pProEX HTa/ sIL-13Rα2 的构建.1 EcoRⅠ/KpnⅠ双酶切 pMD/ sIL-13Rα2 和 pProEX HTaEcoRⅠ /KpnⅠ双酶切原核表达载体 pProEX HTa 和克隆质粒-13Rα2，胶回收大片、小片段，SoiutionⅠ连接酶切片段，连接反：成分 体积SolutionⅠ 5μlsIL-13Rα2 4μlpProEX HTa(EcoRⅠ/KpnⅠ) 1μl总体积 10μl


本文编号：3346945