CSE对肺血管内皮细胞凋亡和VEGF/VEGFR2表达的影响

发布时间：2021-08-19 21:34

　　目的：了解香烟烟雾提取物（CSE）是否诱导人肺微血管内皮细胞（HPMEC）凋亡以及CSE浓度和干预时间对HPMEC凋亡的影响。探究CSE干预是否影响HPMEC中血管内皮生长因子及其受体2（VEGFA/VEGFR2）在转录及蛋白质层面的表达,从而推测CSE可能通过VEGF/VEGFR2表达下调机制引起HPMEC凋亡参与慢性阻塞性肺疾病（COPD）的发生发展过程。方法：体外培养HPMEC予不同浓度CSE干预及相同浓度CSE干预不同时间长度后检测细胞凋亡以比较不同组间凋亡率。筛选出最佳干预浓度和干预时间长度后检测CSE干预后HPMEC中VEGF/VEGFR2mRNA和蛋白质表达较非干预组是否存在差异。全部数据采用SPSS19.0统计软件进行分析,显著性水平取a=0.05。结果：不同浓度CSE（0%,0.5%,1%,2.5%,5%,10%）干预HPMEC均引起凋亡率高于对照组（P<0.01）,且上述各组间两两比较有显著差异（P<0.01）,除0.5%CSE干预组外,上述其余各组HPMEC坏死率明显高于对照组且各组间两两比较有显著差异（P<0.01）；相同浓度CSE（1%）干预... 

【文章来源】：中南大学湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
缩略词表
第一章 前言
第二章 对象、材料与方法
    2.1 研究对象
    2.2 主要设备和试剂
        2.2.1 主要实验仪器与器材
        2.2.2 主要试剂
        2.2.3 主要实验用溶液配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 细胞培养
        2.3.2 香烟烟雾提取物(CSE)的制备
        2.3.3 细胞分组
        2.3.4 双染法检测细胞凋亡
        2.3.5 实时定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测mRNA的表达
        2.3.6 Western Blot检测VEGF/VEGFR2蛋白质的表达
    2.4 统计学分析
第三章 结果
    3.1 CSE干预对HPMEC凋亡的影响
        3.1.1 不同浓度CSE对HPMEC凋亡的影响
        3.1.2 CSE干预不同时间对HPMEC凋亡的影响
    3.2 CSE干预对HPMEC VEGF/VEGFR2 mRNA表达的影响
    3.3 CSE干预对HPMEC VEGF/VEGFR2蛋白质表达的影响
第四章 讨论
    4.1 肺微血管内皮细胞的培养
        4.1.1 肺微血管内皮细胞的提取
        4.1.2 肺微血管内皮细胞的纯化
        4.1.3 肺微血管内皮细胞生长于纤维粘连蛋白的关系
    4.2 CSE对内皮细胞的凋亡的影响
        4.2.1 内皮细胞凋亡机制
        4.2.2 内皮细胞凋亡与临床疾病
        4.2.3 内皮细胞凋亡与吸烟的关系
    4.3 CSE对内皮细胞的VEGF/VEGFR2 mRNA表达的影响
    4.4 CSE对HPMEC中VEGF/VEGFR2蛋白质表达的影响
        4.4.1 VEGF/VEGFR2与吸烟、COPD的关系
        4.4.2 VEGF/VEGFR2在吸烟或COPD患者中降低的可能机制
第五章 结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Epithelial Cell Apoptosis and Lung Remodeling[J]. Kazuyoshi Kuwano.  Cellular & Molecular Immunology. 2007(06)



本文编号：3352183