TNFα、IL-1RA基因多态性与矽肺的相关性研究
发布时间:2021-09-04 19:27
研究目的 近年研究发现,某些细胞因子基因多态性与矽肺易感性密切相关。编码细胞因子的基因多态性通过影响转录造成其表达量的差异,从而影响矽肺的发生和严重程度,也造成了矽肺发病的个体差异。肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)是目前研究较多的细胞因子,对SiO2粉尘引起的呼吸道炎症和进行性纤维化起重要作用,其基因多态性影响细胞因子的表达产量和矽肺的严重程度。本研究欲对中国矽肺患者TNF-α、IL-1RA(IL-1的一个亚型)基因多态性分布进行研究,揭示其基因多态性与中国汉族人矽肺易感性的相关性,为进一步阐明TNF-α、IL-1RA基因多态性在矽肺发病中的作用提供重要的遗传学资料,以期能更好地保护矽肺易感人群的健康。 对象与方法 在中国西南地区某钢铁集团公司随机抽取自愿合作的矽尘接触工人212名,其中有75例矽肺患者(Ⅰ期44例、Ⅱ期23例、Ⅲ期8例)作为病例组,137名无矽肺的矽尘接触者作为对照组。所有研究对象均来自某钢铁集团公司有确切矽尘接触史、职业史和作业环境相似的人群,均为男性汉族,彼此无血缘关系,无免疫系统疾病和其他重大疾病。对所有研究对象拍摄高仟伏X射线后前...
【文章来源】:四川大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:69 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
TNF一a一308位点PcR一RELP片段质量分数为3%的琼脂糖凝胶电泳图
循环15次后,再于72℃延伸smni;PCR扩增反应结束后,短暂离心,置于4℃保存备用。常规PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳结果如图9,目的条带清晰,且没有杂带,说明引物设计合成无误,即可进行内侧引物实时荧光定量PCR扩增。
(3)根据荧光定量PCR测定Ct值对IL一IAR+2018多态位点进行基因分型荧光定量PRC的扩增曲线可以分为三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期阶段。在荧光信号背景阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,我们无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物己经不再呈指数增加,PCR的终产物量与起始模板之间没有线性关系,所以用终产物量不能计算出起始模板的量。为了定量和比较的方便,在定量PRC中引入了三个非常重要的概念:荧光基线、荧光阐值和Ct值。基线是指PRC循环开始时,虽然荧光信号累积,但仍在仪器可以检测的灵敏度下。基线范围的定义是从三个循环开始起到Ct值前的第三个循环止。荧光闭值的确定是3一S1个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。Ct值的定义是:每个反应管内的荧光信号达到设定的阂值时所经历的循环数。可见Ct值取决于闽值,而阐值取决于基线,基线取决于实验的质量,因此Ct值是一个完全客观的参数。根据PRC的基本原理可
【参考文献】:
期刊论文
[1]肿瘤坏死因子-α及其Ⅱ型受体基因多态性与矽肺[J]. 李霖,余晨,齐放,李德鸿,刘北辰. 中华劳动卫生职业病杂志. 2004(05)
[2]肿瘤坏死因子-α及其Ⅱ型受体基因多态性与煤工尘肺[J]. 李霖,余晨,齐放,李德鸿,徐孝华,李鹏,侯强,张秀美,王鹤龄. 中华劳动卫生职业病杂志. 2004(04)
[3]白细胞介素-1家族细胞因子基因多态性对全身性感染患者预后的影响[J]. 马朋林,陈德昌,潘家绮,杜斌. 中华医学杂志. 2002(18)
[4]遗传易感性研究在职业医学中的应用前景[J]. 郑玉新,何凤生. 工业卫生与职业病. 1999(03)
[5]肺泡巨噬细胞源细胞因子与肺纤维化[J]. 陈佰义. 国外医学.呼吸系统分册. 1994(04)
本文编号:3383869
【文章来源】:四川大学四川省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】:69 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
TNF一a一308位点PcR一RELP片段质量分数为3%的琼脂糖凝胶电泳图
循环15次后,再于72℃延伸smni;PCR扩增反应结束后,短暂离心,置于4℃保存备用。常规PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳结果如图9,目的条带清晰,且没有杂带,说明引物设计合成无误,即可进行内侧引物实时荧光定量PCR扩增。
(3)根据荧光定量PCR测定Ct值对IL一IAR+2018多态位点进行基因分型荧光定量PRC的扩增曲线可以分为三个阶段:荧光背景信号阶段,荧光信号指数扩增阶段和平台期阶段。在荧光信号背景阶段,扩增的荧光信号被荧光背景信号所掩盖,我们无法判断产物量的变化。而在平台期,扩增产物己经不再呈指数增加,PCR的终产物量与起始模板之间没有线性关系,所以用终产物量不能计算出起始模板的量。为了定量和比较的方便,在定量PRC中引入了三个非常重要的概念:荧光基线、荧光阐值和Ct值。基线是指PRC循环开始时,虽然荧光信号累积,但仍在仪器可以检测的灵敏度下。基线范围的定义是从三个循环开始起到Ct值前的第三个循环止。荧光闭值的确定是3一S1个循环的荧光信号的标准偏差的10倍。Ct值的定义是:每个反应管内的荧光信号达到设定的阂值时所经历的循环数。可见Ct值取决于闽值,而阐值取决于基线,基线取决于实验的质量,因此Ct值是一个完全客观的参数。根据PRC的基本原理可
【参考文献】:
期刊论文
[1]肿瘤坏死因子-α及其Ⅱ型受体基因多态性与矽肺[J]. 李霖,余晨,齐放,李德鸿,刘北辰. 中华劳动卫生职业病杂志. 2004(05)
[2]肿瘤坏死因子-α及其Ⅱ型受体基因多态性与煤工尘肺[J]. 李霖,余晨,齐放,李德鸿,徐孝华,李鹏,侯强,张秀美,王鹤龄. 中华劳动卫生职业病杂志. 2004(04)
[3]白细胞介素-1家族细胞因子基因多态性对全身性感染患者预后的影响[J]. 马朋林,陈德昌,潘家绮,杜斌. 中华医学杂志. 2002(18)
[4]遗传易感性研究在职业医学中的应用前景[J]. 郑玉新,何凤生. 工业卫生与职业病. 1999(03)
[5]肺泡巨噬细胞源细胞因子与肺纤维化[J]. 陈佰义. 国外医学.呼吸系统分册. 1994(04)
本文编号:3383869
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