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树突状细胞源NEDD4L在Th2分化和过敏性肺炎中的作用

发布时间:2021-09-08 13:05
  目的:初步研究E3泛素连接酶NEDD4L(neural precursor cell expressed developmentally downregulated gene 4-like)对小鼠树突状细胞(dendritic cells,DCs)亚群和功能以及DCs诱导的Th1/Th2分化的影响,进而揭示NEDD4L分子在树突状细胞和过敏性肺炎中的作用。方法:1.采用Cre-Loxp重组酶系统,建立DCs特异性敲除NEDD4L小鼠模型。将NEDD4Lf/f小鼠(C57BL/6背景)与CD11c-Cre+/-小鼠(C57BL/6背景)进行杂交繁育,运用聚合酶链式反应(PCR)技术鉴定其子代小鼠基因型,筛选出DCs特异性敲除NEDD4L的小鼠(KO,CD11c-Cre+/-NEDD4Lf/f)和同窝野生型对照小鼠(WT,CD11c-Cre-/-NEDD4Lf/f)。2.采用流式细胞术检测WT和KO型小鼠脾脏中DCs和cDCs亚群比例变化以及CD11c

【文章来源】:江苏大学江苏省

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

树突状细胞源NEDD4L在Th2分化和过敏性肺炎中的作用


NEDD4家族E3泛素连接酶结构图

模式图,小鼠模型,鉴定结果,特异性


图4.1 DCs特异性敲除NEDD4L小鼠模型的建立和鉴定结果(A)小鼠繁育模式图 (B)CD11c-Cre及NEDD4L Loxp基因型鉴定结果(C)BMDCs中NEDD4L表达水平Figure 4.1 The establishment and identification of mouse model of NEDD4L specific knockoutin DCs. (A)The pattern diagram of mouse breeding (B)The genotype identification of CD11c-creand NEDD4L loxp (C)The expression of NEDD4L in BMDCs.4.2 DCs 中缺失 NEDD4L 不影响脾脏 DCs 群体、外周 CD4+T 与 CD8+T细胞的比例以及 DCs 表面膜分子表达脾和黏膜相关淋巴组织是人体重要的外周免疫器官和组织,而DCs是机体中功能

炎症因子,缺失,外源性抗原,细胞共培养


图 4.3 DCs 中缺失 NEDD4L 对炎症因子分泌的影响(A)BMDCs 中炎症因子 mRNA 水平 (B)BMDCs 培养上清中 IL-4 蛋白水平Figure 4.3 The effects of deletion of NEDD4L in DCs on secretion of inflammatory cytokines(A)The mRNAtranscription levels of inflammatory cytokines in BMDCs (B)The IL-4 protein levein culture supernatant of BMDCs. The representative data are one of three independent assays. Data armean ±SEM. NS,no significant difference,*P<0.05,**P<0.01,***P<0.001.4.4 DCs 中缺失 NEDD4L 不影响 BMDCs 激活的抗原特异性 CD4+T 细胞增殖,但促其向 Th2 分化4.4.1 BMDCs 与 OT-II 小鼠 CD4+T 细胞共培养DCs 的主要功能是摄取、加工处理和呈递抗原。当 DCs 遇到外源性抗原时,DC


本文编号:3390837

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