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小鼠IL-33干扰RNA逆转录病毒表达载体的构建及其对吸烟引起的小鼠肺部炎症的作用

发布时间:2021-10-09 05:03
  IL-33(inteleukin 33,IL-33)作为IL-1家族的一员,与其特异性受体ST2结合,参与固有免疫和获得性免疫。IL-33主要通过促进Th2细胞免疫反应,在自身免疫疾病、变态反应性疾病、心血管疾病和神经退行性疾病等的发生发展中起重要的作用。慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary diseases,COPD)是一组以肺实质与小气道受到病理损害后,导致慢性不可逆性气道阻塞、呼气阻力增加、肺功能不全为共同特点的肺疾病的总称。吸烟是COPD发病的重要因素。为了研究IL-33下调对相关炎症反应的影响,本研究应用RNA干扰技术(RNA interference, RNAi)特异性下调小鼠IL-33 mRNA和蛋白的表达,探讨IL-33下调在吸烟诱导的小鼠急性肺炎模型中的作用。研究内容如下:一、根据GenBank中小鼠IL-33 mRNA序列(AY905582),按照RNA干扰序列设计原则,运用GenScript公司的siRNA design center siRNA Target Finder设计针对小鼠IL-33的小干扰RNA(small i... 

【文章来源】:汕头大学广东省

【文章页数】:63 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小鼠IL-33干扰RNA逆转录病毒表达载体的构建及其对吸烟引起的小鼠肺部炎症的作用


shRNA序列设计

质粒图谱,筛选基因,潮霉素,绿色荧光蛋白


图2-3 pRNATin-H1.4质粒图谱Figure 2-3 Schematric structure of pRNATin-H1.4/RetroATin-H1.4/Retro,是 GenScript 公司专门设计的 siRNA 逆0.5 μl,与 100 μl DH5α 感受态细胞混 H1.4 启动子用于 siRNA 表达的启动,shRNA 可以从酶切位点另带有潮霉素 B 筛选基因,绿色荧光蛋白(coral grP)用于跟踪质粒转染进 PT67 的情况。:RNATin-H1.4/Retro15

酶切图谱,酶切鉴定,酶切图谱,菌落


pRNATin-H1.4/Retro酶切鉴定(XhoI/BamHI)

【参考文献】:
期刊论文
[1]ST2作为Th2细胞亚群标志以及其与支气管哮喘的关系的研究[J]. 巩芷娟,李伟毅,陈广洁,席晔斌,王保国,周光炎.  上海免疫学杂志. 2002(02)



本文编号:3425687

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