烟草提取物通过TGF-β1/SMAD2通路诱导RLE-6TN细胞凋亡

发布时间：2021-10-15 02:25

　　目的：研究烟草提取物（CSE）对体外培养的大鼠II型肺泡上皮细胞的影响并探究其中的潜在机制。方法：1.体外培养大鼠肺泡上皮RLE-6TN细胞株24 h后,分别加入0.5%,1.0%和2.0%CSE共培养48 h, Hoechst染色法检测烟草提取物对细胞核变化的影响；流式细胞术检测细胞早期凋亡率；蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测转化生长因子（Transforming Growth Factor-betal,TGF-β1）, smad2的表达量和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3裂解片段（Cleaved caspase-3）的活性。2.TGF-β1受体抑制剂（SB431542） 500 nmol·L-1作用RLE-6TN细胞株24h后,加入2.0%CSE共培养48 h。Western blot分别检测Smad2和Cleaved caspase-3的活性。 结果：1.经不同浓度的CSE（0.5%,1.0%,2.0%）作用RLE-6TN细胞48 h后,经Hoechst染色后,各CSE处理组均可见部分凋亡细胞,胞核发白、固缩、染色质边集等现象,对照组细胞核呈现均匀的淡蓝色荧光。随机视野... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：40 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１巧光显微镜下观察（４〇０物ＣＳＥ对ＲＬＥ－６ＴＮ细胞核形态的变化，（Ｊ±ｓ，?ｎ＝３）

白及Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白表达的影响。随着Ｃ化浓度的增力口，ＴＧＦ－ｐｌ、稱酸化??的Ｓｍａｄ２?（ｐ－Ｓｍａ（ｎ＾ｎ?Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白的表达均上调，与对照组比较差异有??统计学意义（ｆ＜０．Ｍ）。结果见图３和附图３。??１?５－１?ｃｏｎｔｒｏｌ??０?二?Ｔ?Ｅｉａ?０－５％??％?＊?；．?Ｂ?１０％??ａ?＊?＂?Ｔ?ｒｒｉ?Ｉ?ＣＤ?２．０％??１?１．０－?．Ｘ?＊?ｉ?ｉｎ??Ｓ?三??己?；：：＝?：：：＝?＊?－??Ａ?？：二?？?、？？二?巧二??立。Ｃ?工：：；?１?；?宣??Ｉ?：＝：?＝?：：?Ｅ?ｉ??芭?ｉ：?１?ｉ?Ｉ?与圓??〇．〇１１１１４口１１１１１口户１１１１４印１１??Ｖ》、?糸??分?。护?卢??々?。公??合会??皆??图３?ＷＢ检测ＴＧＦ－ｐｉ／Ｓｍａｄ２信号通路蛋白及Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３蛋白表达量。??注：＊表示实验姐与对照组相比，差异有统计学意义。??Ｆｉｇ?３?Ｐｒｏ化ｉｎ?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＴＧＦ－ｐｌ，Ｓｍａｄ２?ａｎｄ?Ｃｌｅａｖｅｄ?ｃａｓｐａｓｅ－３?ｗａｓ?ｄｅｔｅｃｔｅｄ?ｂｙ?ＷＢ?？??Ｎｏｔｅ：?＊?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?化过ｔ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?ｆｒｏｍ?化ｅ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ?ｇｒｏｕｐ?ｖｓ?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ

ｂＳＨＢＢｓＩ??附图．１巧光显微镜下观察（４００倍）ＣＳＥ对ＲＬＥ－６ＴＮ细胞核形态变化的影注：Ａ：对照组；Ｂ？Ｄ康示０．５％，１．０％和２．０％ＣＳＥ处理姐，箭头指示洞亡Ｆｉｇ．ｌ?Ｎｕｃｌｅａｒ?ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ?ｃｈａｎｇｅ?ｏｆ?ＣＳＥ－ｔｒｅａ化ｄ?ＲＬＥ－６ＴＮ?ｗｅｒｅ?ｏｂｓｅｒｖｅｄ?ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ?ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ?（４００?Ｘ）??Ｎｏｔｅ；?Ａ：?ｃｏｎｔｒｏｌ?ｇｒｏｕｐ；?Ｂ?？Ｄ：?ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｓ?０．５％，?１．０％?ａｎｄ?２．０％?ＣＳＥ?ｔｒｅａｔｍｅｎａｒｒｏｗｓ?ｉｎｄｉｃａｔｅｄ?ａｐｏｐｔｏｔｉｃ?ｃｅｌｌｓ．??


本文编号：3437257