ANGⅡ/ANG1-7体系在海水吸入性肺损伤中对内质网应激反应诱导内皮凋亡的调节作用

发布时间：2021-10-23 07:25

　　背景海水淹溺是引起意外性死亡的最常见原因之一。而淹溺后人体吸入海水引起的损伤也会带来显著的社会和公共卫生问题。急性肺损伤（acute lung injury,ALI）和急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）是海水吸入后导致的最常见的并发症。在海水吸入引起的肺损伤中,肺泡上皮和微血管内皮屏障损伤是引起炎细胞以及水肿液渗出和浸润的基础形态改变。而肺泡细胞尤其是肺微血管内皮细胞层在海水刺激下发生的凋亡又是引起肺泡气血屏障损伤的重要原因。因此,抑制肺微血管内皮凋亡的发生和进展在海水吸入性肺损伤的治疗中有重要作用。内质网是负责蛋白生物合成和修饰的主要细胞器。当细胞受到损伤因素刺激时,内质网的蛋白合成方式会产生改变,而在受损伤的细胞中蛋白折叠相关的应激反应也随之产生。内质网应激反应（Endoplasmic reticulum stress,ER stress）能够诱发未折叠蛋白反应（unfolded protein response,UPR）。未折叠蛋白反应是细胞的一种自适应反应,而持续过度的未折叠蛋白反应最终会引起细胞凋亡的发生。未... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：109 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

内质网应激对大鼠海水吸入性肺损伤病理改变、湿干比以及血管通透性的作用图1-1（A）正常对照组，（B）海水吸入4h组，（C）海水4h+0.5mg/kg4-PBA组，（D）海水4h+1mg/kg4-PBA组，（E）海水4h+5mg/kg4-PBA组

著的磷酸化激活（P<0.001）。另外，值得一提的是，IRE1 下游分子 XBP1s 在正常大鼠肺组织中几乎没有表达，而海水的刺激则使其出现了显著的增加（P<0.001）。而内质网应激抑制剂 4-PBA 预处理后，一系列相关蛋白的表达都出现了不同程度的抑制（P<0.001）。该部分结果说明了在海水吸入性肺损伤中，内质网应激反应起到了关键性的作用，且与 JNK 凋亡相关的 IRE1 通路出现了明显的激活。另外，XBP1s 从无到有的变化也为后续串联基因治疗相关的研究提供了依据。

图 1-3 大鼠海水吸入性肺损伤中内质网应激反应对细胞凋亡的影响图 1-2 （A）正常对照组，（B）海水吸入 4h 组，（C）海水 4h+5mg/kg 4-PBA 组n=8，***P<0.001vs 正常对照组，###P<0.001vs 海水 4h 组。3.4 大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVECs）分离、培养及鉴定为进行后续的细胞学实验，我们提取了原代 RPMVECs 细胞。如图所示，原代分离的 RPMVECs 细胞最初呈现毛细血管样结构，当原代细胞团聚合后，细胞会呈现出典型的鹅软石样的表型（图 1-4 A）。而原代细胞进行传代后，二代细胞会呈现出显著的内皮细胞的表型，即扁平状细胞。同时传代细胞中还会有一些紧密均匀排列短梭型或者多角形的细胞（图 1-4 B）。除了细胞表型观测外，我们还通过对血管内皮特异性标志物 CD31 进行了免疫荧光染色标记（图 1-4 C），也说明了 RPMVEC细胞的分离及培养是成功的。


本文编号：3452749