Sec3对中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的气道上皮细胞黏蛋白分泌的影响

发布时间：2021-10-24 05:58

　　目的探讨栓链因子复合物亚基Sec3对中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）诱导的气道上皮细胞黏蛋白（MUC）分泌的影响。方法体外培养人气道上皮细胞16HBE,随机分为8组:空白对照组、表皮生长因子受体（EGFR）磷酸化抑制剂AG1487组、Sec3siRNA组、阴性siRNA对照组、NE组、NE+AG1478、NE+Sec3siRNA组、NE+阴性siRNA组。采用Western blot法检测Sec3蛋白及pEGFR的相对含量;ELISA、RT-PCR法分析细胞培养上清液中MUC5AC的相对含量及细胞中MUC5AC mRNA水平。结果 Sec3siRNA转染显著降低Sec3蛋白表达,提示转染成功,且加入NE对转染效果无干扰。单纯NE刺激组上清液中MUC5AC含量,细胞中MUC5AC mRNA、pEGFR水平显著高于空白对照组（P<0.01）,AG1487可明显抑制上述刺激作用;转染Sec3siRNA可阻断MUC5AC分泌（P<0.01）,但并不影响其转录水平表达（P>0.05）。结论在NE诱导的人气道上皮黏液高分泌过程中,栓链因子复合物亚基Sec3对黏蛋白出胞有重要的介导作用... 

【文章来源】：华中科技大学学报(医学版). 2014,43(03)北大核心CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 细胞的培养及处理
    1.3 细胞转染
    1.4 MTT法检测各组细胞的活力
    1.5 Western blot分析pEGFR、Sec3蛋白含量
    1.6 ELISA法检测培养上清中MUC5AC蛋白含量
    1.7 RT-PCR检测MUC5AC mRNA水平
    1.8 统计学处理
2 结果
    2.1 各组细胞增殖的变化
    2.2 转染细胞的Sec3表达及pEGFR水平测定
    2.3 NE、AG1487、Sec3siRNA对MUC5AC蛋白转录及分泌水平的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]依赖Ca2+的ATP过量释放在机械牵张所致气道上皮黏蛋白5AC高分泌中的作用[J]. 苏晖晖,尤列·皮尔曼,维克多·科罗索夫,周向东.  华中科技大学学报(医学版). 2012(01)
[2]血红素加氧酶-1对人气道黏液高分泌的影响[J]. 雷蕊霞,周向东.  华中科技大学学报(医学版). 2010(03)
[3]黏蛋白MUC5AC在慢性阻塞性肺疾病患者气道中的表达及其临床意义[J]. 赖异,李雯.  华中科技大学学报(医学版). 2009(03)



本文编号：3454717