TLR4/NF-κB在烟雾暴露大鼠肺血管重塑中的表达及意义

发布时间：2021-10-25 07:38

　　目的:观察烟雾暴露环境下肺血管Toll样受体4（TLR4）、核因子-κB（NF-κB）亚基P65蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）的表达,探讨TLR4及NF-κB信号通路在大鼠肺血管重塑中的可能作用机制。方法:SPF级健康雄性SD大鼠48只,随机分为对照组（control组）、烟雾暴露4周组（S4组）、烟雾暴露8周组（S8组）和烟雾暴露12周组（S12组）,每组各12只。制备烟雾暴露大鼠模型,HE染色法观察肺血管形态学变化,并测量各组大鼠肺血管管壁面积/血管总面积（WA%）和血管壁厚度/血管外径（WT%）。免疫组织化学染色法检测肺血管TLR4、P65和PCNA的表达,蛋白含量用平均积分吸光度来表示。RT-q PCR检测肺血管TLR4的mRNA表达,并分析各组肺血管WA%、WT%、TLR4蛋白和TLR4 mRNA、P65蛋白、PCNA蛋白与肺血管重塑的相关性及TLR4蛋白与WA%、WT%、P65蛋白、PCNA蛋白之间的相关性。结果:与对照组比,烟雾暴露组大鼠肺血管WA%及WT%都明显增高,且WA%及WT%与烟雾暴露时间呈正相关关系（P<0.05）;烟雾暴露组肺血管TLR4蛋白、P65... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2016,32(11)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

各组大鼠肺动脉HE染色图

Figure2．TheproteinexpressionofTLＲ4，P65andPCNAinthepulmonaryvasculartissuesineachgroup(immunohistochemicalstai-ning，×400)．图2免疫组化染色观察各组大鼠肺血管TLＲ4、P65和PCNA蛋白的表达3各组大鼠肺动脉TLＲ4的mＲNA表达从表2可见，烟雾暴露组肺血管TLＲ4的mＲNA表达量均明显高于对照组，其表达量与烟雾暴露时间呈正相关性，各组间差异有统计学显著性(P＜0.05)。讨论肺血管重塑的机制目前仍不太明确，其病理生理实质也是血管的慢性炎症反应［8］。吸烟、细菌感染等是引起肺部慢性炎症和血管重塑的重要因素，其发生机制目前也还不是太明确。本实验通过建立吸烟大鼠肺血管重塑模型，经HE染色观察到烟雾暴露后各组大鼠肺血管都发生了不同程度的炎症浸润及管壁变形，增厚，管腔狭窄等，以吸烟12周组血管的改变最为明显，且进一步通过计算证实血管重塑的客观指标(WA%和WT%)与烟雾暴露时间呈正相关性，这与秦艳艳等［9］的实验结果是一致的，提示烟雾暴露致使肺血管重塑大鼠模型制备成功，且肺血管重塑的程度随烟雾暴露时间延长而逐渐加重。TLＲ4在肺内肺外广泛分布，参与调节细胞炎症因子合成和分泌、调控机体免疫、识别和清除病毒等。近年来研究发现，TLＲ4还可能在血管重塑中起核心作用，NF-κB作为TLＲ4下游最为重要的转录子，在TLＲ4与受体结合后，TLＲ4/NF-κB信号通路激活，启动血管炎症反应［10］。唐晓敏等［11］发现TLＲ4通过激活NF-κB信号通路参与血管紧张素-II所致的高血压大鼠的血管重塑;田刚等［12］发现COPD患者肺血管中TLＲ4及NF-κB水平明显高于非COPD组，且发现其水平与肺血管壁周围炎症浸润程度，肺血管平滑肌细胞增生程度都呈正相关性;Yang等［13］研究发现TLＲ4通过?

。所有数据以均数±标准差(mean±SD)表示，各组间差异显著性检验采用单因素方差分析，各组均数间的两两比较用SNK-q检验。相关性分析采用Pearson法。以P＜0.05为差异有统计学意义。结果1HE染色结果对照组肺部结构大致正常，肺泡较完整，肺动脉管腔较大，血管平滑肌较均匀，管壁较光滑，管壁及周围较少炎性细胞浸润。烟雾暴露组大鼠肺组织结构都有不同程度破坏，肺泡结构紊乱，肺泡壁变薄或断裂，肺血管都有不同程度增生，管壁增厚或管腔变形，管壁及周围可见较多炎性细胞浸润，以烟雾暴露12周组改变最为明显，见图1。Figure1．PulmonaryvascularmanifestationsofratsineachgroupwithHEstaining(×400)．图1各组大鼠肺动脉HE染色图烟雾暴露组肺血管重塑定量分析观察指标(WA%和WT%)都明显高于对照组，且跟烟雾暴露时间呈正比关系，各组间差异有统计学显著性(P＜0.05)，见表2。表2各组大鼠肺血管形态学定量分析及TLＲ4蛋白、P65蛋白、PCNA蛋白和TLＲ4mＲNA的表达结果Table2．Thequantitativeanalysisofthemorphologicalchanges，theproteinexpressionofTLＲ4，P6andPCNA，andthemＲNAexpressionofTLＲ4inthepulmonaryvessels(Mean±SD．n=12)GroupWA%WT%TLＲ4P65PCNATLＲ4mＲNAControl34．16±1．0822．18±1．220．28±0．090．16±0．030．25±0．041．00±0．12S447．75±0．91*40．45±1．09*0．34±0．07*0．27±0．02*0．32±0．05*1．31±0．23*S861．73±1．05*#51．56±1．38*#0．48±0．05*#0．32±0．05*#0．41±0．05*#1．57±0．21*#S1269．84±0．79*#△63．58±1．67*#△0．53±0．06*#△0．45±0．03*#△0．51±0．02*#△3．81±0．68*#△WA%:vascu

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3456946