长链非编码RNA在肺纤维化中的表达及其调控机制的初步探讨

发布时间：2021-10-31 10:48

　　目的：目前特发性肺纤维化发病机制仍不明确,缺乏有效治疗方法。有关肺纤维化发生过程中基因改变的相关研究逐渐增多,并通过相关基因的研究以寻找新的分子治疗靶点。长链非编码RNA作为一类新的非编码RNA,其调控机制及与疾病的关系已成为研究热点。本研究通过观察博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化模型中lncRNA表达谱的变化,分析lncRNA的结构特点、与：mRNA的位置序列关系,最终选择lncRNA-MRAK088388以及MRAK081523作为进一步研究对象,探索其在肺纤维化发生中的调控机制。方法：Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组及模型组,通过气管内注入BLM法建立肺纤维化动物模型,于28 d时处死大鼠留取肺组织,部分置于液氮冷冻,其余组织进行常规固定-石蜡包埋及戊二醛固定-环氧树脂包埋处理。Masson染色和羟脯氨酸碱水解法检测肺内胶原含量的变化,透射电子显微术观察肺组织超微结构改变；利用lncRNA芯片技术检测对照组及模型组肺组织lncRNAs和mRNAs表达谱的改变,进行GO分析及pathway分析,通过NCBI数据库、UCSC数据库等对lncRNA进行生物信息学分析；筛选差异表... 

【文章来源】：滨州医学院山东省

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．博莱霉素诱导的肺纤维化模型鉴定（Ａ）正常组肺组织超微结构：肺泡上皮??细胞形态结构完整，肺间隔宽度正常，含少量胶原纤维

为探索ＩｎｃＲＮＡ在肺纤维化的潜在生物学功能，我们通过基因芯片方法检测??了在博莱霉素诱导的肺纤维化中ＩｎｃＲＮＡ表达谱，此外巧片结果还包含了?ｍＲＮＡ??表达谱。散点图及聚类分析（图２）直观显示了?ＩｎｃＲＮＡｓ和ｍＲＮＡｓ在不用样本??中的转录表达情况。原始数据经标准化等处理后，根据倍数变化筛选出差异表达??２１??

根据ＩｎｃＲＮＡ的差异表达倍数，我们选择了在模型组中上调表达较明显的??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６?（表１Ａ）进行原位杂交实验，检测它们在肺組织的表达变??化及细胞定位，蓝紫色代表基因的阳性表达区域。结果如图３所示，模型组中??ＡＪ００５３９６和Ｓ６９２０６的表这均较对照组明显增加，与巧片表达趋势一致。同时可??观察到ＡＪ００５３％和％９２０６主要位于肺间质细胞的胞质中


本文编号：3467993