柴朴汤对肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响

发布时间：2017-05-06 00:07

  本文关键词：柴朴汤对肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：研究目的:通过研究柴朴汤对肝郁型哮喘大鼠mi R-21、PTEN表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响,从而探讨柴朴汤防治肝郁型哮喘的机制与mi R-21、PTEN及嗜酸性粒细胞凋亡之间的关系。研究方法:1)70只雄性SD大鼠随机原则分为肝郁组(n=30)与非肝郁组(n=40),肝郁组大鼠于第1~28天进行慢性不可预见性应激刺激,非肝郁组不做任何处理。造模结束后检测肝郁组与非肝郁组大鼠体重变化、糖水消耗量、血液肾上腺皮质激素(ACTH)含量,评价肝郁型模型。造模成功后将肝郁组与非肝郁组每10只分为一组一共7组,非肝郁组分为对照组、正常中药组、哮喘组、哮喘治疗组,肝郁组分为肝郁哮喘组、肝郁哮喘治疗组、地塞米松组。哮喘组、哮喘治疗组、肝郁哮喘组、肝郁哮喘治疗组、地塞米松组5组采用用卵蛋白(OVA)诱导复制哮喘模型。自雾化致敏大鼠造模开始,每次雾化吸入致敏剂前30 min,各组大鼠均予以胃内注药处理。正常中药组、哮喘治疗组、柴朴汤组予以柴朴汤颗粒(每克颗粒含生药18.5g)350 mg/kg灌胃;地塞米松组大鼠予以地塞米松1 mg/kg灌胃;正常对照组、哮喘模型组、肝郁哮喘组3组大鼠予以等量生理盐水处理。干预结束后,根据各组大鼠的症状及体征进行评分;肺功能测定,小动物呼吸机测定各组大鼠在不同浓度乙酰胆碱激发下测定的气道阻力;苏木素-伊红染色观察各组大鼠气道及肺组织病理改变;涂片法测定各组大鼠支气管肺泡灌洗液中白细胞、嗜酸性粒细胞数,嗜酸性粒细胞比例;用流式细胞计数测定支气管灌洗液EOS凋亡率;荧光实时定量PCR检测血液及肺组织mi R-21水平表达;蛋白质免疫印迹(Western-blot)和RT-PCR检测肺组织表达PTEN及PTEN m RNA水平。结果:1、肝郁模型的鉴定:1)体重比较:肝郁组体重286.69±7.36(g)造模结束后较对照组233.46±8.52(g)明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);2)肝郁组糖水消耗量8.41±0.79(ml)造模结束后较对照组19.42±0.86(ml)明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);3)正常对照组血浆ACTH含量709±263(ng/L)造模结束后较肝郁组1768±256(ng/L)明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);2、各组大鼠症状评分及肺功能结果:哮喘组和肝郁哮喘组大鼠支气管症状评分及肺功能测定气道阻力高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);肝郁哮喘高于哮喘组,差异有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组低于哮喘组,差异有统计学意义(P0.05);肝郁哮喘治疗组、地塞米松组均低于肝郁哮喘组,,差异有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组、肝哮治疗组及地塞米松组之间无明显统计学差异,差异无统计学意义(P0.05);支气管肺泡灌洗液细胞分类计数白细胞细胞总数、嗜酸性粒细胞总数、及嗜酸性粒细胞百分比哮喘组与肝郁哮喘组均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);其中肝郁哮喘组高于哮喘组,差异有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组低于哮喘组,差异有统计学意义(P0.05);肝郁哮喘治疗组、地塞米松组均低于肝郁哮喘组,,差异有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组、肝哮治疗组及地塞米松组之间无明显统计学差异(P0.05)。支气管肺组织HE染色可见:正常对照组、正常中药组支气管肺组织结构正常完整,未见炎症细胞浸润,支气管壁厚度正常;哮喘组:大量粘液栓,镜下黏膜上皮局部脱落,基底层膜增厚及玻璃样变,粘膜下水肿,粘液腺增生。杯状细胞增多,平滑肌增生肥大,可见平滑肌破坏断裂,在管壁及粘液栓中可见嗜酸性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞和浆细胞浸润。相对于哮喘组肝郁哮喘炎症反应及气道重塑更为严重;余各组支气管肺组织病理改变明显轻于哮喘模型组及肝郁哮喘组。3、各组大鼠肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞凋亡率哮喘组(4.20±0.41)及肝郁哮喘组(4.29±0.28)嗜酸性粒细胞凋亡率较对照组(5.82±0.48)明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);哮喘组(4.20±0.41)与肝郁哮喘组(4.29±0.28)差异无统计学意义(P0.05)。哮喘治疗组(15.74±0.34)嗜酸性粒细胞凋亡率高于哮喘组(4.20±0.41),差异具有统计学意义(P0.05),肝哮治疗组(15.77±0.42)及地塞米松组(15.43±0.55)嗜酸性性粒细胞凋亡率明显高于肝哮治疗组,差异具有统计学意义(P0.05),哮喘治疗组、肝哮治疗组及地塞米松组之间无明显统计学差异(P0.05)。4、各组大鼠血液及肺组织中mi R-21的相对表达量哮喘组、肝郁型哮喘组血液和肺组织mi R-21的相对表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);肝郁哮喘组血液和肺组织mi R-21相对表达量高于哮喘组,差异具有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组血液和肺组织mi R-21相对表达量低于哮喘组,差异具有统计学意义(P0.05);肝哮治疗组及地塞米松组均低于肝郁哮喘组,差异具有统计学意义(P0.05);哮喘治疗组、肝哮治疗组、地塞米松组差异无统计学意义(P0.05)。5、各组大鼠肺组织PTENm RNA、PTEN蛋白的相对表达量哮喘组及肝郁哮喘组肺组织PTENm RNA及蛋白相对表达量低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05);哮喘组表达高于肝郁型哮喘组,哮喘治疗组表达高于哮喘组(P0.05),差异具有统计学意义;肝哮治疗组及地塞米松高于肝郁哮喘组(P0.05),差异具有统计学意义;哮喘治疗组、肝哮治疗组、地塞米松组差异无统计学意义(P0.05)。结论:1、肝郁型哮喘大鼠血液mi R-21表达增加,且与哮喘的症状、炎症反应程度呈正相关,mi R-21可能作为哮喘控制水平的一个重要指标;2、柴朴汤在治疗肝郁型哮喘过程中可以通过抑制mi R-21的表达、上调的PTEN表达,从而促进嗜酸性粒细胞的凋亡,可能通过抑制mi R-21-PTEN通路导致嗜酸性粒细胞凋亡。
【关键词】：支气管哮喘 PTEN mi R-21 嗜酸性粒细胞 凋亡
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R562.25
【目录】：

• 中文摘要4-8
• 英文摘要8-14
• 主要缩略词14-16
• 第一章 前言16-20
• 第二章 材料与方法20-32
• 第三章 结果32-40
• 第四章 讨论40-44
• 第五章 结论44-46
• 参考文献46-52
• 附图52-62
• 综述62-72
• 参考文献67-72
• 硕士期间撰写论文72-74
• 致谢74

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李树全;嗜酸性粒细胞的分离与纯化[J];广西医科大学学报;2001年06期

2 姚细安,曾泳而,童裕维,唐小平,尹炽标;200例严重急性呼吸综合征患者嗜酸性粒细胞检测结果的分析[J];检验医学;2004年05期

3 韩梅,刘荣焕,张洁;嗜酸性粒细胞异常增高者2例分析[J];齐鲁医学检验;2005年05期

4 陶蓉;;嗜酸性粒细胞型类白血病1例报告[J];中国厂矿医学;2006年03期

5 于秀芹;;慢性嗜酸性粒细胞肺炎1例[J];辽宁医学杂志;2007年03期

6 韩军;陈辉树;;早幼嗜酸性粒细胞形态的研究[J];贵阳中医学院学报;2012年06期

7 周细龙;;嗜酸性粒细胞的增多与减少有何临床意义?[J];赤脚医生杂志;1979年03期

8 董丽娟;;嗜酸性粒细胞为什么会增多?[J];中国农村医学;1986年01期

9 牧野僗平 ,南景一;嗜酸性粒细胞与疾病[J];日本医学介绍;1987年03期

10 王国云,贺才标,万书平;66例急性原发性血小板减少性紫癜骨髓嗜酸性粒细胞的回顾分析[J];综合临床医学;1990年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 成焕吉;杨清然;尤海龙;张云峰;鲁继荣;;高嗜酸性粒细胞综合征7例临床分析[A];中华医学会第十三届全国儿科呼吸学术会议论文汇编[C];2012年

2 王思勤;李英;朱敏;马希涛;张晓菊;;嗜酸性粒细胞肺炎1例并文献复习[A];中华医学会呼吸病学年会——2013第十四次全国呼吸病学学术会议论文汇编[C];2013年

3 唐金凤;周道银;陈慧英;李时英;唐古生;;支气管肺泡灌洗液及痰嗜酸性粒细胞增多的临床价值[A];中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编[C];2011年

4 佟红艳;钱靖;麦文渊;娄引军;;持续嗜酸性粒细胞增高伴肝脏自发巨大血肿一例[A];中华医学会血液学分会第十三届全国血栓与止血学术会议暨“血栓栓塞性疾病（血栓与止血）基础与临床研究进展”论文摘要汇编及学习班讲义[C];2011年

5 罗佛全;刘志刚;刘玉琳;龚十妹;严涛;;蛔虫变应原致喘豚鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞形态测量分析[A];第一届全国变态反应学术研讨会论文汇编[C];2001年

6 李颖能;饶沃明;赵子文;何绿茵;扬一言;黄健;;严重急性呼吸综合症急性期血液嗜酸性粒细胞降低[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

7 王成彬;;细胞固定在两种细胞联合培养研究中的应用[A];第五次全国中青年检验医学学术会议论文汇编[C];2006年

8 王成彬;黄振国;李洛谊;叶伟基;林伟基;丛玉隆;;嗜酸性粒细胞与支气管上皮细胞相互活化诱导细胞表面粘附分子表达及其信号转导通路[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

9 雷霏;董震;;变应性疾病中水通道蛋白1在嗜酸性粒细胞迁移趋化中的作用[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编（上）[C];2007年

10 林进;徐立勤;徐丹怡;孙德本;;Churg-Strauss综合征患者血清嗜酸性粒细胞阳离子蛋白水平的测定[A];浙江省医学会2008年风湿病年会论文汇编[C];2008年

中国重要报纸全文数据库 前3条

1 李传宝;血液中嗜酸性粒细胞为何常增高[N];家庭医生报;2006年

2 王振坤;人体的血液防线之三[N];家庭医生报;2007年

3 武汉大学医学院附属中山医院主任医师 李定国;肺炎：原是“蛔仔”作怪[N];大众卫生报;2005年

中国博士学位论文全文数据库 前6条

1 陈鸿鹄;肠道派氏结嗜酸性粒细胞亚群的发现及其黏膜免疫调控功能与机制的研究[D];浙江大学;2013年

2 周宏斌;香烟烟雾暴露诱导的小鼠肺部损伤模型中嗜酸性粒细胞的作用研究[D];浙江大学;2014年

3 杨文钰;人类胚胎干细胞/诱导型多潜能干细胞向功能成熟嗜酸性粒细胞分化的研究[D];北京协和医学院;2011年

4 汪诚;膜连蛋白Ⅰ参与地塞米松上调A549细胞吞噬凋亡的嗜酸性粒细胞[D];安徽医科大学;2007年

5 赵卫东;根除幽门螺杆菌及药物治疗对功能性消化不良影响的研究[D];山东大学;2013年

6 顾红英;儿童功能性消化不良流行病学和发病机制的研究[D];苏州大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 蔡雪倩;嗜酸性粒细胞及中性粒细胞型慢性鼻—鼻窦炎患者临床对比研究[D];安徽医科大学;2015年

2 潘旭;人类CD34+造血干细胞向成熟嗜酸性粒细胞诱导分化的研究[D];北京协和医学院;2014年

3 丰艳;嗜酸性粒细胞性胃肠炎[D];蚌埠医学院;2015年

4 代红磊;慢性鼻窦炎患者中变应性因素的临床研究[D];天津医科大学;2015年

5 刘坤;柴朴汤对肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响[D];南华大学;2015年

6 杨清然;高嗜酸性粒细胞综合征7例临床分析[D];吉林大学;2012年

7 郭君;嗜酸性粒细胞抗肿瘤作用及其机制的初步研究[D];兰州大学;2008年

8 卢会秀;嗜酸性粒细胞及伴嗜酸性粒细胞增多性疾病[D];河北医科大学;2010年

9 巩静;白细胞介素18在卵清蛋白诱发的小鼠哮喘模型中对嗜酸性粒细胞肺内募集作用的研究[D];中国医科大学;2007年

10 安方玉;嗜酸性粒细胞增高模型小鼠的抗肿瘤及免疫调节活性研究[D];兰州大学;2008年

  本文关键词：柴朴汤对肝郁型哮喘miR-21、PTEN的表达及嗜酸性粒细胞凋亡的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：347352