CSE通过上调ERK/p-ERK通路导致U937细胞糖皮质激素抵抗

发布时间：2021-11-03 23:45

　　【背景】慢性阻塞性肺疾病（COPD）是一种以持续呼吸症状和气流受限为特征的疾病。烟雾暴露是导致COPD的主要原因。吸烟使患者呼吸系统暴露于有毒颗粒或气体,造成的慢性气流阻塞。COPD的主要病理改变是慢性支气管炎及肺气肿,导致该病理表现的原因是气道及肺组织持续性炎症反应。针对其炎症机制从而应用有效的抗炎药物是治疗COPD的重点。虽然近年来大量研究明确了糖皮质激素在COPD患者中有抑制慢性炎症反应的作用,然而在COPD患者中存在糖皮质激素抵抗,从而限制了糖皮质激素对COPD患者的治疗效果。组蛋白去乙酰化酶2（HDAC2）和糖皮质激素受体α（GR-α）表达失调是是COPD患者产生糖皮质激素抵抗的重要机制。细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路是丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号转导途径的重要亚族之一。ERK调节包括炎症在内的多种生物学行为。烟草烟雾提取物（CSE）能够促进ERK1/2与p-ERK1/2蛋白表达,从而促进呼吸道炎症性疾病进展。抑制ERK1/2表达可促进U937细胞内HDAC2表达。激活的HDAC2作用于GR-α使其去乙酰化而活化从而抑制炎症基因的表达,且激活的糖皮质激素受体亦可激... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：77 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CSE对U937细胞的毒性检测Figure1.TodetectthedrugtoxicityofCSEtoU937cells

地塞米松磷酸盐溶液干预 CSE 组（CSE）细胞后，细胞内 IL-8 表达的抑制率为（4.06±1.45）%。此外，对照组（Con）中，细胞内 IL-8 表达的抑制率为 50%时地塞米松磷酸盐溶液的浓度约为 10-8.9mol/L；CSE 组（CSE）中细胞内 IL-8 表达的抑制率为 50%时地塞米松的浓度约为 10-4.7mol/L。结果表明：（1）随着地塞米松浓度的降低，细胞内 IL-8 表达的抑制率逐渐下降揭示地塞米松抑制 U937 细胞分泌 IL-8，具有抗炎作用；（2）对照组与 CS组相比，在同一浓度地塞米松干预条件下，CSE 组细胞内 IL-8 表达的抑制率较对照组低。此外，应用 CurveExpert 1.4 版软件进行 ELISA 结果数据拟合并计算后得出：对照组（Con）中，IL-8 抑制率为 50%时地塞米松的浓度约为 10-9mol/L；CSE 组中，IL-8 抑制率为 50%时地塞米松的浓度约为10-5mol/L。综上，揭示了 CSE 能够诱导 U937 细胞产生糖皮质激素抵抗。

CSE 的 10%FBS 完全培养基培养，12h 后，加入 10ng/ml TNF-α，1h 后，加入 10-9mol/L 地塞米松磷酸盐溶液，11h 后，收集细胞；CSE 组（CSE）干预方式为（CSE+10ng/mlTNF-α+10-9mol/L Dex）：以含 0.5%CSE 的 10%FBS 完全培养基培养，12h 后，加入 10ng/ml TNF-α，1h 后，加入 10-9mol/L 地塞米松磷酸盐溶液，11h 后，收集细胞。Western Blotting 法检测各组细胞内 ERK、p-ERK、HDAC2、GR-α、GAPDH 蛋白表达,采用独立样本 t 检验进行统计学分析。结果如图 3 所示， CSE 组（CSE）与对照组（Con）相比，细胞内 ERK1/2 与 p-ERK1/2 表达显著增加而 HDAC2 与 GR-α表达显著减少，表明 CSE 促进 U937 细胞内 ERK1/2 与 p-ERK1/2 表达，抑制 HDAC2 与 GR-α表达。揭示了 CSE 通过上调 ERK/p-ERK 通路减少 HDAC2 和 GR-α蛋白表达，从而诱导糖皮质激素抵抗。


本文编号：3474568