SIGIRR对气道上皮TOLL样受体致炎信号通路的作用及机制研究

发布时间：2021-11-26 02:44

　　背景与目的：TOLL样受体（TLRs）广泛分布于人的气道上皮细胞中,它们介导了病原微生物所致呼吸道感染时的气道炎症反应。单免疫球蛋白样白介素1受体相关蛋白（SIGIRR）是TIRs超家族成员,它可以负性调节TLR/IL-1受体介导的固有免疫应答。本实验是以人气道上皮细胞株H292作为研究对象,明确SIGIRR在人气道上皮细胞中发挥的作用及可能的细胞内机制。方法：1. SIGIRR的亚细胞定位研究（1）构建一个增强型绿色荧光蛋白（EGFP）标记的重组真核细胞表达质粒载体（SIGIRR-EGFP）,并经测序证实。（2）运用脂质体转染的方法,将重组质粒（SIGIRR-EGFP）瞬时转染H292细胞,在激光共聚焦显微镜下,进行亚细胞定位研究；并以空质粒pEGFP-N1转染的H292细胞（EH292）、未转染的H292细胞（H292）对照。（3）采用免疫细胞化学的方法进行亚细胞定位对照,进一步证明SIGIRR在H292细胞中的亚细胞定位情况。2.致炎因子的ELISA检测（1）通过800μg/ml的G418筛选稳定转染细胞,单克隆化操作后,利用荧光定量RT-PCR挑选出SIGIRR表达相对较强的细... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：125 页

【学位级别】：博士

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正文 SIGIRR对气道上皮TOLL样受体致炎信号通路的作用及机制研究
    前言
    第一章 SIGIRR对气道上皮TOLL样受体致炎信号通路的作用
        第一节 真核表达载体SIGIRR-EGFP的构建与鉴定
            材料与方法
            结果
        第二节 气道上皮细胞中SIGIRR亚细胞定位研究
            材料与方法
            结果
        第三节 SIGIRR过表达对气道上皮细胞致炎因子产生的影响
            材料与方法
            结果
        讨论
    第二章 SIGIRR对气道上皮TOLL样受体致炎信号通路调控机制研究
        第一节 SIGIRR过表达对气道上皮细胞TLR4、5、9表达的影响
            材料与方法
            结果
        第二节 SIGIRR与Toll样受体接头分子MyD88的相互作用
            材料与方法
            结果
        讨论
    全文结论
    致谢
    参考文献
文献综述 TOLL样受体介导免疫应答的负性调节
    参考文献
攻读博士学位期间发表的论文
英文论著



本文编号：3519256