氨茶碱对大鼠气道平滑肌细胞增殖抑制和促凋亡作用及其机制的实验研究

发布时间：2021-12-11 18:02

　　目的：探讨氨茶碱（aminophylline）对体外培养的大鼠气道平滑肌细胞（ASMC）增殖抑制和促凋亡作用及其与基质金属蛋白酶（MMP）、c-fos的关系，在细胞和分子水平为氨茶碱治疗哮喘提供理论依据。方法：以含10％胎牛血清（FBS）的DMEM培养液培养大鼠ASMC，第4—6代细胞用于实验，细胞用不同浓度氨茶碱（0、50、100、200、300、400mg/L）处理，采用细胞计数法及MTT法观察并比较不同浓度氨茶碱对培养细胞的增殖抑制作用；RT-PCR半定量检测细胞c-fos mRNA的表达；明胶酶谱和Western blot检测细胞MMP2、MMP9的活性及表达：用苏木精/伊红（HE）及吖啶橙/溴化乙啶（AO/EB）染色，光学显微镜和荧光显微镜观察细胞凋亡形态学改变，并计算凋亡百分率；用琼脂糖凝胶电泳分析DNA片断。 结果：MTT法及细胞计数法观察到：100mg/L以上浓度氨茶碱对体外培养大鼠ASMC增生具有明显的抑制作用（p＜0.05），随着药物剂量的增大，其抑制作用增强，且呈时间—剂量依赖效应。RT-PCR可见各组细胞均有c-fos表达，即371bp处电泳区带。氨茶碱作... 

【文章来源】：中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】：71 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
前言
第一部分 大鼠ASMC的培养、鉴定、传代、冻存
第二部分 氨茶碱对大鼠ASMC的增殖抑制及其与c-fos表达的关系
第三部分 氨茶碱对大鼠ASMC的分泌MMPs的影响
第四部分 氨茶碱对体外培养大鼠ASMC的促凋亡作用
小结
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致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]哮喘的新概念和免疫学研究进展[J]. 李明华.  浙江中西医结合杂志. 2003(11)
[2]5-氟脲嘧啶和赖诺普利诱导合成型平滑肌凋亡及c-fos、c-myc、p53基因表达的研究[J]. 冷静,姚玉宇,尹航,黄峻,彭韬.  南京医科大学学报. 2001(05)



本文编号：3535138