RAGE对TNF-α诱导A549细胞MMPs/TIMPs表达的调控作用
发布时间：2021-12-19 16:54
目的:明确肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor,TNF-α）对肺上皮A549细胞中基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）和金属蛋白酶组织抑制剂（tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs）家族基因表达的影响,初步探讨晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products,RAGE）在肺上皮细胞炎性损伤后细胞外基质（extracellular matrix,ECM）代谢中的作用及机制,为靶向调控急性呼吸窘迫综合征（acute respiratory distress syndrome,ARDS）病程中ECM重塑提供实验基础。方法:（1）通过MTT实验检测1ng/m L、10 ng/m L和50ng/m L TNF-α对A549细胞增殖活力的影响;（2）采用10ng/m L TNF-α诱导A549细胞构建ARDS体外模型,应用实时荧光定量聚合酶链式反应（quantitative real-time polymerase c...
【文章来源】：右江民族医学院广西壮族自治区
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
总RNA样本琼脂糖凝胶电泳结果图
图 2-1 TNF-α 对 A549 细胞活力的影响igure 2-1 The effect of TNF-α on the viability ofA549 ce（ ± ，*P< 0.05，vs. control)中 IL-8、RAGE、MMPs 和 TIMPs 转录水平的度、纯度及完整性检测检测结果如表 2-1、图 2-2 所示，结果提示，样验需求，可用于后续的 RNA 反转录实验。表 2-1 样品总 RNA 浓度和纯度able 2-1 The concentration and purity of the total RNA1 组 2 组 control TNF-α control TNF-α con 772 1060 716 1014 672.042 2.008 2.023 2.028 2.0
2.2.2 TNF-α 对 A549 细胞中炎症因子和 RAGE mRNA 转录水平的影响前炎症因子 TNF-α 可诱导细胞产生炎症损伤，为明确本研究 TNF-α 对 A549 的炎症刺激效果，我们通过 qRT-PCR 技术分析 TNF-α 处理 A549 细胞对炎症因子 IL-8 的影响。实验结果显示，RAGE 和 IL-8 基因的相对表达量与对照组相比，10ng/mL TNF-α 刺激A549 细胞 8h 后，细胞内 IL-8 mRNA 转录水平升高约 100 倍（P＜0.01），且 TNF-α 组中 RAGE mRNA 较对照组明显增加（P＜0.01），结果见表 2-2 和图 2-3。表 2-2A549 细胞中 IL-8 和 RAGE 基因 mRNA 相对表达量（ ± ）Table 2-2 The relative mRNAexpression of IL-8 and RAGE inA549 cells指标 control TNF-α 组 t 值 P 值IL-8 1.00±0.01 103.97±2.07 49.642 ＜0.001RAGE 1.00±0.03 1.60±0.04 11.288 ＜0.001
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对气道重塑小鼠TGF-β1/Smads通路的影响[J]. 刘慧慧,刘嘉羿,彭美玉,黎玉辉,李春桥. 南方医科大学学报. 2018(11)
[2]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[3]肺泡上皮细胞在肺部免疫中的作用[J]. 支佳琦,王青青. 中国免疫学杂志. 2018(10)
[4]MMPs和TIMPs与肿瘤关系的研究进展[J]. 杨锡彤,秦燕,王光明. 广东医学. 2018(16)
[5]宣肺化瘀方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smad表达的影响[J]. 张秀,胡静,覃惠,温昊天,顾凯娟,郑敏宇,安世英. 中草药. 2018(14)
[6]血清TIMP-4、ES、FFA水平联合检测在慢性心力衰竭患者预后评估中的应用价值[J]. 李海艳,许庆华. 中国卫生工程学. 2018(01)
[7]肺纤维化药物治疗机制研究进展[J]. 郭敬文,张振玲,邵华. 中国职业医学. 2017(05)
[8]MMP-9、TIMP-1在肺纤维化中作用的研究进展[J]. 高娟,王添印,韩茹,李淑岷. 山东医药. 2017(26)
[9]组织基质金属蛋白酶系统与心室重塑[J]. 郑熙,朱鹏立,余惠珍. 大连医科大学学报. 2016(04)
[10]血清KL-6、SP-A、SP-D及MMP-7对特发性肺纤维化的诊断意义及与肺功能的关系[J]. 鲁未,赵卉,魏红. 安徽医科大学学报. 2016(06)
博士论文
[1]急性肺损伤幼鼠肺Ⅱ型上皮细胞和SP-A及SP-D变化及地塞米松干预研究[D]. 舒林华.中国医科大学 2006
本文编号：3544728
【文章来源】：右江民族医学院广西壮族自治区
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
总RNA样本琼脂糖凝胶电泳结果图
图 2-1 TNF-α 对 A549 细胞活力的影响igure 2-1 The effect of TNF-α on the viability ofA549 ce（ ± ，*P< 0.05，vs. control)中 IL-8、RAGE、MMPs 和 TIMPs 转录水平的度、纯度及完整性检测检测结果如表 2-1、图 2-2 所示，结果提示，样验需求，可用于后续的 RNA 反转录实验。表 2-1 样品总 RNA 浓度和纯度able 2-1 The concentration and purity of the total RNA1 组 2 组 control TNF-α control TNF-α con 772 1060 716 1014 672.042 2.008 2.023 2.028 2.0
2.2.2 TNF-α 对 A549 细胞中炎症因子和 RAGE mRNA 转录水平的影响前炎症因子 TNF-α 可诱导细胞产生炎症损伤，为明确本研究 TNF-α 对 A549 的炎症刺激效果，我们通过 qRT-PCR 技术分析 TNF-α 处理 A549 细胞对炎症因子 IL-8 的影响。实验结果显示，RAGE 和 IL-8 基因的相对表达量与对照组相比，10ng/mL TNF-α 刺激A549 细胞 8h 后，细胞内 IL-8 mRNA 转录水平升高约 100 倍（P＜0.01），且 TNF-α 组中 RAGE mRNA 较对照组明显增加（P＜0.01），结果见表 2-2 和图 2-3。表 2-2A549 细胞中 IL-8 和 RAGE 基因 mRNA 相对表达量（ ± ）Table 2-2 The relative mRNAexpression of IL-8 and RAGE inA549 cells指标 control TNF-α 组 t 值 P 值IL-8 1.00±0.01 103.97±2.07 49.642 ＜0.001RAGE 1.00±0.03 1.60±0.04 11.288 ＜0.001
【参考文献】：
期刊论文
[1]针刺对气道重塑小鼠TGF-β1/Smads通路的影响[J]. 刘慧慧,刘嘉羿,彭美玉,黎玉辉,李春桥. 南方医科大学学报. 2018(11)
[2]基质金属蛋白酶的研究进展[J]. 刘明明,李爱玲,修瑞娟. 中国病理生理杂志. 2018(10)
[3]肺泡上皮细胞在肺部免疫中的作用[J]. 支佳琦,王青青. 中国免疫学杂志. 2018(10)
[4]MMPs和TIMPs与肿瘤关系的研究进展[J]. 杨锡彤,秦燕,王光明. 广东医学. 2018(16)
[5]宣肺化瘀方对肺纤维化大鼠肺组织TGF-β1/Smad表达的影响[J]. 张秀,胡静,覃惠,温昊天,顾凯娟,郑敏宇,安世英. 中草药. 2018(14)
[6]血清TIMP-4、ES、FFA水平联合检测在慢性心力衰竭患者预后评估中的应用价值[J]. 李海艳,许庆华. 中国卫生工程学. 2018(01)
[7]肺纤维化药物治疗机制研究进展[J]. 郭敬文,张振玲,邵华. 中国职业医学. 2017(05)
[8]MMP-9、TIMP-1在肺纤维化中作用的研究进展[J]. 高娟,王添印,韩茹,李淑岷. 山东医药. 2017(26)
[9]组织基质金属蛋白酶系统与心室重塑[J]. 郑熙,朱鹏立,余惠珍. 大连医科大学学报. 2016(04)
[10]血清KL-6、SP-A、SP-D及MMP-7对特发性肺纤维化的诊断意义及与肺功能的关系[J]. 鲁未,赵卉,魏红. 安徽医科大学学报. 2016(06)
博士论文
[1]急性肺损伤幼鼠肺Ⅱ型上皮细胞和SP-A及SP-D变化及地塞米松干预研究[D]. 舒林华.中国医科大学 2006
本文编号：3544728
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