哮喘发作患者外周血嗜酸细胞差异表达基因克隆及特性研究

发布时间：2022-01-03 03:16

　　研究背景 支气管哮喘（简称哮喘）是常见的慢性疾病,目前认为哮喘是多种类型细胞控制和参与的以气道炎症、气道重建及气道反应性增高为主要特征的慢性非特异性炎症。由于哮喘临床表型及对治疗反应的不均一性,哮喘更像是一种综合征,而不是一个特殊的疾病实体。哮喘一直是全球关注的一个重要疾病,对哮喘的发病机制的研究也在不断地深入。当前哮喘的基础研究涉及诸多领域,包括哮喘的遗传学基础、环境因素与哮喘、免疫机制（包括抗原递呈、早期生活事件与哮喘,Th1/Th2平衡）及免疫治疗、气道炎症及抗炎治疗、气道重建及防治措施等诸多方面。分子遗传学的研究已经证实,哮喘是一种复杂的多基因遗传病,哮喘的发生、发展是基因与环境因素共同导致的复杂过程。遗传学为宿主对不同环境因素产生反应提供了很好的基础,这在复杂疾病研究上起着重要作用,因此理解基因与环境相互作用的真正分子机制也是研究者所面临的重要挑战。 当前针对哮喘气道炎症机制的研究则是哮喘药物开发、哮喘基因治疗的基础,也是当前治疗的主要靶点。尽管近十年来在哮喘的遗传学方面取得了巨大的进步,而哮喘变应性炎症产生有赖于众多基因的调节,因此去证实某些特异的与疾病发展相关... 

【文章来源】：南方医科大学广东省

【文章页数】：105 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

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二_一一一一一一一翌进坐竺汤一一一一l一4，图1一5可以看出，etsetr在27个循环达平台期，dri台期。从此实验可知，用SPuerSMARTDcNAs”thessi增出质高量足的EOSds一cDNA。果分析(图-14，图1·5)治疗前后所扩增出的EOSds一cD段集中于300bp一3以刃bp，其中在looobp处可见一亮带，说量较好。

酶切片段5’端分别与接头1和接头ZR连接后，利用接头序列引物Pri刃nerl和G3PDH3’引物、G3PDH3’和5’引物分别扩增看家基因G3PDH。PCR产物经电泳分析，并将图像经凝胶成像系统软件分析，结果(见图2一1)接头序列引物Primerl和G3PDH3’引物扩增产物较G3PDH3’和5’引物所得产物相差小于4倍，说明大多数cDNA片段都己经连接上了设计的接头，连接效率较高。图2一l:接头连接效率检测Ijnlel:接头R仙阴rl和G3DPH基因3’引物扩增以连接A山甲tor产物沁川e:2G3DPH基因5’和3’引物扩增以连接Ad即otrl的l的怡sertlcDNA为模板的etsertlcDNA为模板的产物;

【参考文献】：
期刊论文
[1]嗜酸性粒细胞参与哮喘气道重建的机制研究进展[J]. 赵海金,蔡绍曦.  实用医学杂志. 2005(01)
[2]应用Super SMART cDNA合成技术扩增哮喘嗜酸性粒细胞总RNA[J]. 赵海金,蔡绍曦,邹飞,佟万成,万为人.  第一军医大学学报. 2004(09)
[3]应用抑制消减杂交克隆支气管哮喘病人嗜酸细胞差异表达基因[J]. 徐劲松,蔡绍曦,邹飞,佟万成,赵海金.  第一军医大学学报. 2004(05)
[4]支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗及教育和管理方案)[J]. 中华医学会呼吸病学分会哮喘学组.  中华内科杂志. 2003(11)



本文编号：3565452