孟鲁司特钠通过抑制TLR4/NF-κB信号通路影响哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡

发布时间：2022-01-05 07:29

　　目的:探讨孟鲁司特钠（Mon）对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖和凋亡及炎症因子分泌的影响,阐明哮喘大鼠气道重塑及炎症反应的分子机制。方法:采用卵清蛋白致敏和激发构建急性哮喘大鼠模型,原代培养大鼠气道平滑肌细胞,取第5代细胞用于实验。实验分为对照组（正常气道平滑肌细胞）、模型组（哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞）和治疗组（哮喘模型大鼠气道平滑肌细胞+Mon干预）。采用噻唑蓝（MTT）法检测各组细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,酶联免疫吸附实验（ELISA）法检测各组细胞上清液中白细胞介素6 （IL-6）和转化生长因子β1 （TGF-β1）水平,Western blotting法检测各组细胞中增殖细胞核抗原（PCNA）、细胞周期蛋白D1 （CyclinD1）、B淋巴细胞瘤-2 （Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、Toll样受体4（TLR4）和核因子κB （NF-κB）p65蛋白表达水平,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测各组细胞中TLR4和NF-κB p65mRNA表达水平。结果:与对照组比较,模型组和治疗组细胞活性明显升高（P<0.05）,细胞凋亡率明显降低（P&... 

【文章来源】：吉林大学学报(医学版). 2020,46(02)北大核心CSCD

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【部分图文】：

流式细胞术检测各组细胞凋亡率

对照组、模型组和治疗组细胞中PCNA蛋白表达水平分别为0.55±0.02、0.76±0.05和0.65±0.03;CyclinD1蛋白表达水平分别为0.41±0.03、0.83±0.06和0.53±0.03。各组细胞中PCNA和CyclinD1蛋白表达水平分别整体比较差异均有统计学意义（F=26.132,P=0.01;F=78.000,P<0.05）。与对照组比较，模型组和治疗组细胞中PCNA和CyclinD1蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与模型组比较，治疗组细胞中PCNA和CyclinD1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）。见图2。2.5 各组细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达水平

对照组、模型组和治疗组细胞中Bcl-2蛋白表达水平分别为0.31±0.02、0.68±0.03和0.54±0.03,Bax蛋白表达水平分别为0.61±0.03、0.37±0.02和0.45±0.03，各组细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达水平分别整体比较差异有统计学意义（F=142.773,P<0.05;F=61.091,P<0.05）。与对照组比较，模型组和治疗组细胞中Bcl-2蛋白表达水平升高（P<0.05),Bax蛋白表达水平降低（P<0.05）；与模型组比较，治疗组细胞中Bcl-2蛋白表达水平降低（P<0.05），而Bax蛋白表达水平升高（P<0.05）。见图3。2.6 各组细胞中TLR4和NF-κBp65蛋白表达水平

【参考文献】：
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本文编号：3570015