PARC/CCL-18在慢性阻塞性肺疾病中应用价值研究

发布时间：2022-01-09 11:17

　　目的：慢性阻塞性肺疾病（COPD）没有公认的血液标记物来帮助病情严重度和预后评估。肺部活化调节趋化因子/趋化因子配体18（PARC/CCL-18）又名趋化因子配体-18（CCL18）是一种在血清中发现的肺部表达占优势的炎症蛋白。本实验旨在利用酶联免疫吸附法（ELISA法）测量不同分期慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者、健康体检老年人血清中CCL18、白介素-16（IL-16）、白介素-6（IL-6）浓度，从而探讨CCL18在COPD中应用价值，以期评价其在慢性阻塞性肺疾病预后、严重程度的应用价值。方法：选择2012年9月1日至2014年3月10日于中国人民解放军第309医院呼吸内科病房及门诊就诊的符合2011年慢性阻塞性肺疾病全球倡议（GlobalInitiative for Chronic Obstructive Lung Disease，GOLD）诊断标准的-COPD患者。实验分三组，A组为AECOPD组，B组为COPD稳定期组，C组为健康体检老年人作为对照组。其中AECOPD患者72人，COPD稳定期48人，健康对照组40人。采集AECOPD患者入院第1天清晨空腹血清样本，测定血清... 

【文章来源】：中国人民解放军医学院北京市

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CCL18浓度标准曲线

图 3 IL-16 浓度标准曲线1.3.4 血清 IL-6 ELISA 步骤1. 标准品稀释与加样：标准品按说明书稀释成五个梯度，各梯度每孔加样为 50μl。2. 加样：分别设待测样品孔、空白孔。在酶标包被板上待测孔中先加样品液40μl，然后加待测样品10μl。将样品加于酶标板孔底部，不触及孔壁，轻动混匀。3. 温育：封板膜封板后置于37℃温育30 分钟。4. 配液洗涤：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍稀释后备用；揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 弃去，重复5 次，拍干。5. 加酶：除了空白孔外，每孔加入酶标试剂50μl。6. 温育：同步骤3。

7℃避光显色15分钟。. 终止：每孔需加终止液50μl来终止反应。（终止液颜色由蓝色变黄色）0. 测定：以空白孔调零，450nm波长按照顺序测量各孔的吸光度（OD 值）。定必须在加终止液后15 分钟内进行。1.计算：以标准物浓度为横坐标，OD 值为纵坐标，绘出标准曲线，根据样品OD 值从标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物浓度与OD计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD 值代入方程式，计算出样品度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

【参考文献】：
期刊论文
[1]豚鼠中性粒细胞性哮喘模型的建立[J]. 李海银,朱黎明,戴爱国,黄进,曾丹.  中华哮喘杂志(电子版). 2012(04)
[2]慢性阻塞性肺疾病诊治指南（2007年修订版）[J].   中华结核和呼吸杂志. 2007(01)



本文编号：3578613