外源性硫化氢通过下调Rho/Rock信号通路抑制TGF-β诱导的小鼠肺成纤维细胞增殖

发布时间：2022-01-19 21:49

　　目的:探讨Rho/Rock通路在肺纤维化中的作用及外源性硫化氢抗肺纤维化的可能机制,为治疗肺纤维化提供新的实验依据。方法:使用10%DMEM培养液+1%青链霉素培养小鼠肺成纤维细胞（NIH3T3细胞）,放置37℃下5%CO₂培养箱中。等细胞融合至90%,加用0.25%胰酶消化予以传代接种（细胞密度5×10⁴）并放置于培养瓶,待细胞融合至约70%后用于实验。将NIH3T3细胞随机分为A、B、C、D、E5组。各组按以下方法处理:A组（空白对照组）:无处理;B组（TGF-β1组）:加入TGF-β1（5μg/L）;C组（TGF-β1+NaHS组）:加入TGF-β1（5μg/L）及NaHS（40μmol/L）;D组（TGF-β1+Y-27632组）:加入TGF-β1（5μg/L）及Y-27632（10μmol/L）;E组（TGF-β1+NaHS+Y-27632组）:加入TGF-β1（5μg/L）、NaHS（40μmol/L）及Y-27632（10μmol/L）。NaHS及Y-27632均预先处理1h。使用MTT法检测各组细胞增殖水平;WB检测各组细胞纤... 

【文章来源】：南华大学湖南省

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

各组细胞形态（200x）

13图3.2各组在12h、24h、48h细胞存活率注：A、B、C、D、E分别对应为A、B、C、D、E组细胞存活率*：各组与B组比较，P<0.053.3各组蛋白表达量结果用western-blot法检测各组细胞中蛋白表达情况，结果示：TGF-β1组α-SMA及CollagenI蛋白的表达高于空白组，而分别予以NaHS、Y-27632及NaHS+Y-27632干预后，SMA及CollagenI蛋白的表达均下调，差异有统计学意义（P<0.05）。其中TGF-β1+Y-27632组α-SMA及CollagenI蛋白的表达高于TGF-β1+NaHS组及TGF-β1+NaHS+Y-27632组，差异有统计学意义（P<0.05）。同时TGF-β1组中RhoA、Rock1、Rock2蛋白表达高于空白组，而分别予以NaHS、

15表3.6RhoA、Rock1、Rock2蛋白表达量分组RhoAt值P值rock1t值P值rock2t值P值C46.35±1.30*8.0940.00138.27±0.88*55.9720.00141.03±0.88*16.7550.001D37.55±1.377.03±0.4030.63±0.62注：*：各组与D组比较，P<0.05图3.3各组细胞α-SMA、CollagenI蛋白、RhoA、rock1、rock2蛋白表达量注：A、B、C、D、E分别对应为A、B、C、D、E组*：各组与B组比较，P<0.05α-SMACollagenIRhoARock1Rock2GAPDH

【参考文献】：
期刊论文
[1]Rho-ROCK信号通路在肺纤维化中的作用（英文）[J]. 俞文英,余陈欢,戴巍,孙洁胤.  Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences. 2016(01)



本文编号：3597619