Th1/Th2细胞因子在哮喘气道粘液细胞化生和凋亡中的作用

发布时间：2022-01-21 09:48

　　研究背景：大量证据显示哮喘是气道的一种炎症性疾病，T淋巴细胞，特别是Th2细胞在炎症发生发展过程中起关键作用，并还通过招募其他炎性细胞，如嗜酸性粒细胞等进一步加重炎症反应。近年来的研究还显示，气道重塑是哮喘的重要病理改变之一，对哮喘的病理生理起重要作用。在气道重塑改变中，气道粘液细胞化生、增生和肥大是其重要组成部分，这些改变与哮喘的病理生理改变和某些临床表现密切相关，如气流受阻、肺功能下降，特别是哮喘发作或加重时的咳嗽、多痰等。在一些致死性哮喘尸检中，几乎无一例外地发现气道大量粘液栓形成，并阻塞气道。因此，研究哮喘时气道粘液细胞化生和增生发生的机制并寻求拮抗化生途径具有重要临床意义。 研究目的：探索哮喘时气道粘液细胞化生的发生机理，研究Th1／Th2细胞因子在粘液细胞化生中的作用。 研究方法： ① 用ELIsA法检测哮喘动物模型在吸入抗原后肺泡灌洗液中IFNγ和IL-13的改变； ② 采用细胞形态测定法并应用数码成象分析系统，研究哮喘模型吸入抗原后气道粘液细胞特点，并观察在不同细胞因子作用后气道粘液细胞的改变； ③ 采用TUNEL方法，检测在延长抗原接触时... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

一EAB一PAs染色显示吸入抗原5天(B)和15天(C)粘液细胞;TUNEL检测显示5天D原吸鼠TUNEL阳性改，经原吸小鼠

6天经鼻滴注IFN丫、IL一13或生理盐水，再2天后处死动物。结果显示，100ngIFNY可明显加速McM恢复(图3.A)。TUNEL检测显示，IFNY灌注的小鼠气道粘液细胞显示阳性反应，提示细胞核断裂，细胞出现凋亡改变(图3.B)。一山E︸UJ的O芝卜。﹂oqujnZSalineIFN丫IFNYSOng!L一13100ng图3.A滴注生理盐水、IFNY和IL一132天后气道MCM改变

结果1.IFNY诱导正常人气道上皮细胞凋亡为明确工FN7是否能直接诱导粘液细胞凋亡，我们观察了工FNy对体外培养的正常人支气管上皮细胞的作用。NHBES在该培养条件下可产生粘液样物质，即细胞分化为粘液样细胞，AB一PAS染色也证实了这一结论。经Hoechst33342细胞核染色并作TUNEL检测发现，经IFNY处理的NHBEs表现为细胞失去原有形态，胞体伸长，胞质浓缩，特别是细胞核固缩，并见核碎裂;TUNEL实验阳性，提示细胞核DNA有断裂(图1.1，D“F)，对照组细胞形态完整，核染色均匀，TUNEL实验阴性。


本文编号：3600037