粉尘螨疫苗对粉尘螨变应原诱导的小鼠气道变态反应炎症的影响及其机制研究

发布时间：2022-02-15 18:24

　　目的:通过对哮喘模型小鼠鼻腔免疫标准化粉尘螨疫苗进行治疗,探讨标准化粉尘螨疫苗对粉尘螨变应原诱导的变态反应性气道炎症的免疫保护作用,探讨标准化粉尘螨疫苗在支气管哮喘抗原特异性免疫治疗中的机制。方法:1、21只4～6周龄SPF级Balb/c小鼠分成正常对照组、哮喘模型组、标准化粉尘螨疫苗治疗组。正常对照组不做处理。用粉尘螨变应原提取液诱发哮喘制作哮喘小鼠模型,哮喘小鼠模型制作成功后用标准化粉尘螨疫苗（400μg）在小鼠麻醉状态下行鼻腔免疫,连续免疫8次,每次间隔1天,免疫结束1周以后,用50μg/50μl Der f变应原滴鼻激发,每天1次,连续7次。2、各组小鼠气管插管进行支气管肺泡灌洗,观察支气管肺泡灌洗液（BALF）中细胞总数和细胞分类;各组小鼠取肺组织,通过HE染色（haematoxylin and eosin）观察小鼠肺部炎症变化。3、各组小鼠用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中IgE、IgA和IgG2a抗体;检测肺泡灌洗液中IL-10、IL-4和IFN-γ水平;同时检测脾细胞在变应原特异刺激下分泌的IL-10、IL-4和IFN-γ水平。4、各组小鼠用MTT法检测脾淋巴细... 

【文章来源】：南昌大学江西省211工程院校

【文章页数】：37 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

肺组织HE染色（×200）

3.9 流式细胞仪检测CD4+CD25+Foxp3调节性T细胞数量用流式细胞术检测标准化粉尘螨疫苗鼻腔免疫治疗对脾细胞中调节性 T 细胞数量的影响。结果显示，各组脾细胞 CD4+CD25+FOXP3+调节性 T 细胞占 CD4+CD25+淋巴细胞的百分比，分别为正常组 37.31±5.488，模型组 16.273±4.354，疫苗治疗组 32.09±4.503。模型组中调节性 T 细胞数量比正常对照组显著减少，而与模型组相比，标准化粉尘螨疫苗组能明显诱导调节性 T 细胞数量增加（P<0.01）（图 3.7）。上述结果提示，标准化粉尘螨疫苗鼻腔免疫能抑制 Der f变应原诱导的气道高反应和气道炎症，其机理与调节性 T 细胞的诱导有关。

清和肺泡灌洗液中的细胞因子IL-4受到了显著抑制，提示Th2反应受到了。气道高反应性、炎症细胞浸润和特异性IgE抗体水平下降与支气管肺泡中IL-10水平增加有关。炎性细胞因子IL-4的下降与调节性T细胞和耐受粘膜耐受可能是鼻腔免疫治疗的机制之一。在免疫耐受中起重要作用CD25+FoxP3调节性T细胞(regulatory T cells,Treg),在标准化粉尘螨疫免疫治疗后CD4+CD25+FoxP3细胞数量升高。提示标准化粉尘螨疫苗鼻腔机制与诱导调节性T细胞和免疫无能而形成耐受有关。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3627106