不可分型流感嗜血杆菌经NF-κB信号通路抑制组蛋白脱乙酰酶活性促进支气管上皮炎症反应

发布时间：2022-02-25 06:18

　　目的:明确不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）对支气管上皮细胞炎症反应的影响,并初步探讨其作用机制。方法:培养人正常支气管上皮细胞BEAS-2B,采用感染复数（MOI）=10的NTHi感染BEAS-2B细胞后,分别采用ELISA和RT-qPCR分别检测细胞上清中白细胞介素8（IL-8）和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）的表达水平;Western blot检测细胞内IκBα含量以及组蛋白去乙酰化水平,并检测组蛋白脱乙酰酶（HDAC）的表达以及HDAC的酶活性;电泳迁移率变动分析和染色质共沉淀实验分别测定NF-κB以及IL-8的结合活性。通过NF-κB以及HDAC抑制剂预处理细胞后,检测细胞内GM-CSF和IL-8的表达水平。结果:MOI=10的NTHi感染BEAS-2B细胞后,细胞上清中IL-8和GM-CSF含量及其mRNA表达水平均显著升高（P<0.05）; NTHi感染可显著下调胞浆内总IκBα的表达,增强细胞内NF-κB的DNA结合活性,并显著诱导细胞内组蛋白H3和H4的磷酸乙酰化,促进IL-8和RNA聚合酶II的结合;细胞内HDAC的表达水平及酶活性也显著降低（P&... 

【文章来源】：中国病理生理杂志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
材 料 和 方 法
    1 菌株与细胞株
    2 主要实验材料
    3 主要方法
        3.1 细胞培养与NTHi感染
        3.2 ELISA检测细胞因子
        3.3 RT-qPCR实验
        3.4 Western blot检测
        3.5 电泳迁移率变动分析(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)
        3.6 染色质免疫沉淀检测
        3.7 HDAC活性检测
    4 统计学处理
结 果
    1 NTHi诱导支气管上皮细胞表达IL-8和GM-CSF
    2 NTHi诱导IL-8和GM-CSF分泌与NF-κB有关
    3 NTHi诱导BEAS-2B细胞组蛋白磷酸乙酰化
    4 NTHi下调BEAS-2B细胞内HDAC表达与活性
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]不可分型流感嗜血杆菌诱导NCI-H292细胞产生MUC5AC的分子机制[J]. 阳帆,周丽丽,曹艳华,杨志英,邝婧,张园园,李坚.  中国病理生理杂志. 2015(09)
[2]不可分型流感嗜血杆菌通过p38MAPK和NF-κB依赖的方式上调IL-8的表达[J]. 徐峰,夏靖燕,杨燕,徐志豪,沈华浩.  中国病理生理杂志. 2009(01)



本文编号：3643860