脂多糖对大鼠肺微血管内皮细胞血管紧张素转换酶2表达的影响

发布时间：2022-08-07 20:38

　　目的:研究血管紧张素转换酶2（angiotensin converting enzyme-2,ACE2）在大鼠肺微血管内皮细胞（rat pulmonary microvascular endothelial cell ,RPMVEC）上的表达,观察脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）对RPMVEC的损伤作用及ACE2表达的影响。方法:采用RT-PCR、Western blot和免疫组化方法,检测体外培养的RPMVEC是否表达ACE2;引入内参半定量分析10μg/ml的LPS孵育RPMVEC后不同时相点ACE2表达的变化;用MTT比色法测定不同剂量LPS（0.1μg/ml-100μg/ml）作用后RPMVEC在540nm处的吸光度,以反映细胞存活率和代谢活性的变化。结果:1.体外成功分离培养出RPMVEC,并经形态学及FITC-BSI结合实验证实。2.RT-PCR法从细胞总RNA中扩增出ACE2的特异性条带,Western blot法在细胞蛋白提取液中检测出ACE2的蛋白印迹条带,免疫组化实验表明ACE2免疫组化反应产物主要位于RPMVEC的胞膜和胞浆。3.以10μg/... 

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

大鼠肺微血管内皮细胞RPMVEC(原代)×100Fig.1PrimaryculturedRPMVEC×100

大鼠肺微血管内皮细胞RPMVEC(原代单层汇合)×100Fig.2PrimaryculturedRPMVECmonolayer×100

RPMVEC植物凝血素结合特性观察×400Fig.3RPMVECboundtoFITC-labeledBSIunderfluorescencemicroscopy×400


本文编号：3671006