酪氨酸磷酸酶Shp2调控外泌体生成机制及其在肺部急性炎症中的功能研究

发布时间：2022-09-27 12:24

　　急性肺损伤（Acute lung injury,ALI）,及其重症形式急性呼吸窘迫综合征（Acute respiratory distress syndrome,ARDS）是一类死亡率高,难以治疗的危重症疾病。ALI/ARDS以肺泡弥漫性的损伤为病理特征,肺泡结构损伤引起的气血屏障的破坏会导致低氧血症和肺水肿的发生。在ALI/ARDS病理过程中,中性粒细胞在肺泡微环境的炎症和损伤过程中,起到了重要的促进作用。由于肺泡处于哺乳动物呼吸道解剖学的最末端,相应的体内研究手段较为局限。本研究中,我们利用与肺具有相似性的斑马鱼鱼鳔作为体内实时模型,来研究ALI中性粒细胞的浸润。我们发现,鱼鳔显微注射脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）,聚肌胞苷酸（Polyinosinic-polycytidylic acid,Poly IC）以及纳米硅颗粒（Nano-Si O₂）等外源物质,可以显著地引起中性粒细胞向鱼鳔浸润,并且具有时间和剂量依赖性。中性粒细胞的动态追踪显示,LPS鱼鳔注射后中性粒细胞通过鳔管周围的毛细血管或者前肾管周边进入鱼鳔腔。LPS注射后,炎症因子... 

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

外源物质刺激中性粒细胞迁移到斑马鱼鱼鳔。中性粒细胞聚集到外源物质[Poly IC(A),Nano-SiO2(B),IL8(1 ng)(C),MIP-2(2 ng)(D)]注射的5 dpf Tg(mpo:GFP)斑马鱼鱼鳔(虚线指示)(绿色,中性粒细胞;比例尺:100μm)。

中性粒细胞迁移至LPS注射的斑马鱼鱼鳔。A.LPS,Poly IC和Nano-SiO2注射5 dpf斑马鱼鱼鳔后,所引起中性粒细胞迁移至鱼鳔的剂量依赖效应。B.50 ng LPS注射入5 dpf Tg(mpo:GFP)斑马鱼鱼鳔5 h后,荧光共聚焦显微镜观察中性粒细胞在鱼鳔中的聚集情况。(绿色荧光代表中性粒细胞,比例尺60μm)C.不同浓度LPS注射入5 dpf斑马鱼鱼鳔后,中性粒细胞在鱼鳔(虚线表示)的浸润情况。(绿色荧光代表中性粒细胞,比例尺100μm)D.斑马鱼全鱼的中性粒细胞的分布。(绿色荧光代表中性粒细胞,比例尺100μm)E.LPS鱼鳔注射后,斑马鱼(5 dpf)鱼鳔的HE染色,比例尺20μm,40倍物镜。

实时活体观察鱼鳔LPS注射后中性粒细胞的迁移。对Tg(mpo:GFP/flk1:mCherry)斑马鱼鱼鳔注射50 ng LPS后,中性粒细胞浸润到鱼鳔中。(绿色荧光代表中性粒细胞;红色荧光代表血管;白色箭头指示迁移至鱼鳔的中性粒细胞;时间h:m:s;LPS注射40 min后开始拍摄;比例尺70μm)。右上角为每张图的放大图。


本文编号：3681053