基于实时无标记细胞分析系统的气道平滑肌细胞收缩舒张效应检测方法的建立

发布时间：2022-10-05 15:39

　　该研究利用实时无标记细胞分析系统（xCELLigence real-time cell analysis system,RTCA）建立气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells,ASMCs）收缩舒张效应检测方法。筛选适宜细胞接种密度,接种于RTCA检测板中监测细胞动态生长曲线;利用组胺刺激细胞收缩,并计算组胺半数抑制浓度(IC₅₀);在适宜组胺刺激浓度的基础上,利用特布他林模拟细胞舒张效应,并计算半数有效浓度(EC₅₀)。结果显示,ASMCs为4 000个/孔接种密度培养于（16±4） h区间内,符合后续实验需求;组胺作用ASMCs 2 h后的IC₅₀为8.07 mmol/L,故选择8 mmol/L组胺刺激ASMCs可见较为明显的收缩效应;特布他林作用ASMCs 2 h后的EC₅₀为8.08×10^–8 mol/L,故浓度为10 μmol/L和20 μmol/L的特布他林可检测到明显舒张效应（P＜0.05）。利用RTCA可以稳定、有效、可靠地检测ASMC... 

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 细胞来源
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 实验仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 大鼠ASMCs的培养
        1.2.2 基于RTCA筛选大鼠ASMCs接种密度
        1.2.3 监测不同浓度组胺对大鼠ASMCs收缩程度的影响
        1.2.4 监测不同浓度特布他林舒张大鼠ASMCs程度
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 大鼠ASMCs最适接种密度
    2.2 利用组胺进行大鼠ASMCs收缩效应检测
    2.3 利用特布他林进行大鼠ASMCs舒张效应检测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]实时无标记肿瘤细胞凋亡筛选技术体系的建立[J]. 李艳伟,宋兴辉,王佳佳,刘丽,黄莹莹,郭春.  生物技术通报. 2019(10)
[2]利用实时细胞分析系统检测人和大鼠气道平滑肌细胞倍增时间的研究[J]. 王文倩,王宇,徐玉东,杨永清,尹磊淼.  现代检验医学杂志. 2015 (03)
[3]运用实时细胞分析系统监测原代乳鼠心肌细胞的生长及搏动评价抗心律失常药物[J]. 王淑颜,汪溪洁,靳康,惠涛涛,马璟.  中国药理学与毒理学杂志. 2014(06)
[4]一氧化氮对被动致敏人气道平滑肌细胞钾通道的作用[J]. 叶涛,徐永健,张珍祥,刘先胜,杨朝,曹勇,李亚清.  中华结核和呼吸杂志. 2006(04)



本文编号：3686048