NF-κB、PKC在内毒素诱导肺巨噬细胞活化及凋亡中的作用和机制的实验研究

发布时间：2023-04-04 22:45

　　目的：本实验旨在研究细菌内毒素(LPS)介导的肺巨噬细胞核转录因子NF-κB激活及其在细胞凋亡中的作用和机制，探讨蛋白激酶C(PKC)在内毒素激活NF-κB中的作用及地位。 方法：分离、纯化及培养大鼠肺巨噬细胞；以不同浓度的LPS(0μg/ml，0.01μg/ml，0.1μg/ml，1μg/ml，10μg/ml)和不同作用时间(0min，5min，15min，30min，60min，120min)分别刺激小室培养的细胞单层，观察NF-κB的核内浓度及NO合成量的动态变化，选择LPS的最佳用量和作用时间；然后分成四组实验，设正常对照组，LPS处理组，特异性PKC抑制剂(Cal C)阻断组，NF-κB抑制剂(PDTC)阻断组；收集培养的单层细胞及培养液；采用夹心ELISA法定量测定细胞核提取物中的NF-κB水平；免疫组化法检测NF-κB的核内移位变化；硝酸还原酶法测定细胞培养液中NO含量；吖啶橙染色观察凋亡细胞的形态学变化，凋亡电泳实验检测细胞凋亡后基因组DNA的断裂情况。 结果： 1. 随着LPS用量的增加及作用时间的延长，细胞核内的NF-κB水平和培养液中NO含量逐渐增高。NF-κB核...

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【学位级别】：硕士

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论文正文NF-κB、PKC在内毒素诱导肺巨噬细胞活化及凋亡中的作用和机制的实验研究
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    结论
    致谢
    图片
    参考文献
文献综述LPS激活靶细胞NF-κB的机制与途径的研究进展
    参考文献
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本文编号：3782196