具核梭杆菌降低铜绿假单胞菌抗生素敏感性并加重肺上皮细胞炎症反应的研究

发布时间：2023-04-25 21:09

　　目的:慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulomonay disease,COPD)是一种以持续气流受限为特征的慢性呼吸道疾病,病程进行性发展,全球发病率高达15.5%,已成为全球第三大死亡原因。细菌性呼吸道感染,尤其铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginiosa)是导致COPD患者急性加重甚至死亡最主要的因素。抗生素是目前最常用的预防和治疗呼吸道感染的方法。P.aeruginosa在组织黏膜表面定植后,极易形成生物膜。P.aeruginosa包埋在含有大量藻酸盐、多糖编码基因座和多糖合成基因座的胞外多糖聚合物基质内,从而保护P.aeruginosa免受抗生素的干扰,不仅加大了治疗的难度,也提高了患者病情加重甚至死亡的风险。牙周炎是以牙菌斑生物膜为始动因素,发生于牙周支持组织的慢性感染性疾病,与COPD等呼吸系统疾病密切相关。研究证实牙菌斑是呼吸道致病菌的储存库,吸入含有呼吸道致病菌定植的牙菌斑团块是牙周致病菌引发或加重呼吸道感染的主要途径。具核梭杆菌(Fusobacterium nucleatum)是口腔固有菌群,亦是公认的牙周重要致病菌。近来...

【文章页数】：128 页

【学位级别】：博士

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摘要
Abstract
英文缩略语
第一部分 F.nucleatum通过Fad A调控P.aeruginosa胞外多糖合成降低P.aeruginosa抗生素敏感性的研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究对象和分组
        2.2 主要试剂和仪器
        2.3 实验方法
        2.4 统计学分析
    3 结果
        3.1 P.aeruginosa和 F.nucleatum在 COPD急性加重期患者呼吸道菌群中的检出率及其与患者肺功能指数的相关性分析
        3.2 P.aeruginosa和 F.nucleatum有氧共培养促进浮游状态细菌的增殖……
        3.3 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养基质内p H值变化
        3.4 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养促进生物膜内细菌的增殖
        3.5 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养提高生物膜量
        3.6 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养形成致密生物膜
        3.7 F.nucleatum增强P.aeruginosa胞外多糖调控基因pel B和 psl A表达
        3.8 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养降低P.aeruginosa抗生素敏感性
        3.9 F.nucleatum上清液对P.aeruginosa增殖、生物膜形成及抗生素敏感性无显著影响
        3.10 P.aeruginosa和 F.nucleatum共培养增强F.nucleatum Fad A表达
        3.11 F.nucleatum Fad A蛋白促进P.aeruginosa增殖和生物膜形成,降低P.aeruginosa抗生素敏感性
    4 讨论
    5 结论
第二部分 P.aeruginosa和 F.nucleatum联合感染对肺上皮细胞生物学功能的影响
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究对象和分组
        2.2 主要试剂和仪器
        2.3 实验方法
        2.4 统计学分析
    3 结果
        3.1 P.aeruginosa和 F.nucleatum对肺上皮细胞的黏附和侵入效率
        3.2 P.aeruginosa和 F.nucleatum联合感染对肺上皮细胞形态的影响
        3.3 P.aeruginosa和 F.nucleatum联合感染对肺上皮细胞活性的影响
        3.4 P.aeruginosa和 F.nucleatum联合感染对肺上皮细胞炎症反应的影响
    4 讨论
    5 结论
第三部分 基于高通量测序综合分析F.nucleatum诱导肺上皮细胞周期阻滞和高炎症反应的micro RNA-m RNA网络
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 研究对象和分组
        2.2 主要试剂和仪器
        2.3 实验方法
        2.4 统计学分析
    3 结果
        3.1 F.nucleatum黏附并侵入肺上皮细胞
        3.2 F.nucleatum促进肺上皮细胞增殖
        3.3 F.nucleatum诱导肺上皮细胞周期分布变化
        3.4 F.nucleatum增强肺上皮细胞炎性因子表达
        3.5 F.nucleatum抑制STAT3 活性
        3.6 F.nucleatum感染肺上皮细胞的m RNA表达谱与功能富集分析
        3.7 差异表达基因的PPI网络分析和hub基因筛选
        3.8 F.nucleatum感染肺上皮细胞的转录因子-靶基因网路分析
        3.9 F.nucleatum感染肺上皮细胞的mi RNA表达谱与验证
        3.10 mi RNA靶基因预测与mi RNA-m RNA调控网络构建
        3.11 转录因子-miRNA调控网络
        3.12 Fad A抑制mi R-27b-5p和 mi R-7974,增强mi R-146a-5p和 mi R-451a表达
        3.13 FadA增强肺上皮细胞炎性因子分泌
    4 讨论
    5 结论
本论文创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3801068