重组人血清白蛋白-硫氧还蛋白融合蛋白对流感病毒所致急性肺损伤小鼠的保护作用

发布时间：2023-04-25 23:19

　　目的:探讨重组人血清白蛋白(HSA)-硫氧还蛋白(Trx)融合蛋白(HSA-Trx)对流感病毒感染所致急性肺损伤(ALI)小鼠的保护作用。方法:利用毕赤酵母表达系统产生基因重组HAS-Trx融合蛋白,PR8(H1N1)流感病毒诱导ALI小鼠模型,设健康对照组、ALI组、ALI+Trx组和ALI+HSA-Trx组,每组10只。收集各组支气管肺泡灌洗液(BALF),计算细胞总数,测定肺泡中性粒细胞数量,考马斯亮蓝溶液法测定蛋白浓度,ELISA法测定BALF中干扰素γ(IFN-γ)含量。收集肺组织进行苏木精-伊红染色,免疫荧光法检测肺组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)和3-硝基酪氨酸(NO₂-Tyr)的表达。收集血浆,使用CR2000RC分析仪测量血浆中过氧化物浓度。结果:HSA-Trx治疗显著降低ALI小鼠BALF中总细胞、中性粒细胞数量和总蛋白的含量(P<0. 05),降低肺组织中8-OHdG和NO₂-Tyr水平和血浆中过氧化物浓度(P<0. 05),但对肺组织iNOS和IFN-γ的表达无显著抑制效...

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【文章目录】：
材料和方法
    1 实验动物
    2 主要试剂
    3 方法
        3.1 HSA-Trx融合蛋白的产生
        3.2 ALI小鼠模型的建立及实验分组
        3.3 肺灌洗样本分析
        3.4 肺组织的病理学检查
        3.5 血浆过氧化物水平的测定
        3.6 肺组织病毒载量测定
        3.7 FITC标记HSA-Trx评价其在流感病毒感染小鼠BALF中的分布
    4 统计学处理
结果
    1 HSA-Trx对流感病毒感染小鼠体重及存活率的影响
    2 HSA-Trx对流感病毒感染小鼠损伤的相对抑制作用
    3 HSA-Trx对BALF中IFN-γ水平及肺中iNOS表达的影响
    4 HSA-Trx对肺组织氧化应激的影响
    5 在流感病毒感染小鼠BALF中FITC标记的HSA-Trx的分布
讨论



本文编号：3801261