人参皂苷Rg1基于PI3k/Akt通路对人胚肺成纤维细胞MRC-5作用机制及相关临床研究

发布时间：2023-12-29 18:13

　　目的:基于PI-3k/Akt信号通路,探究人参皂苷Rg1(GinsenosideRg1)对人胚肺成纤维细胞MRC-5的干预作用,从细胞层面、信号通路层面研究其对纤维化的作用机制,从而促进间质性肺疾病(ILD)的治疗进展,降低病死率,帮助减轻病患痛苦及经济负担。方法:依据课题设计思路及方案,研究对象为人胚肺成纤维细胞MRC-5,试验药物为人参皂苷Rg1,过氧化氢诱导MRC-5细胞氧化损伤模型建立,实验共分6组进行。1.构建人胚肺成纤维细胞MRC-5细胞的氧化应激模型及选择人参皂苷Rg1的最佳作用浓度。在构建氧化应激模型时,选用目前常用实验试剂过氧化氢(H2O2)作用于试验细胞人胚肺成纤维细胞MRC-5,诱导其出现氧化应激。依据作用于细胞的H2O2浓度不同而进行分组,并在药物作用24h后观察各组的氧化、抗氧化指标的变化情况。通过上述方法测得不同H2O2作用于细胞后的各项指标量,结合查阅相关试验资料,选出H2O2的最佳作用浓度,用于试验中氧化应激模型的建立。人参皂苷Rg1对人胚肺成纤维细胞MRC-5最佳作用浓度的选择,通过查阅资料,设定IC10为最大无毒浓度。使用6个不同浓度的人参皂苷Rg1...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
提要
abstract
引言
第一部分 实验研究
    一、实验材料
        (一)细胞
        (二)主要试剂与耗材
        (三)主要仪器与设备
        (四)实验药物
    二、细胞培养
        (一)细胞复苏
        (二)细胞传代
    三、实验方法
        (一)CCK-8法检测细胞增殖
        (二)细胞分组
        (三)Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞凋亡
        (四)Real time PCR法检测基因表达
        (五)Western Blotting检测蛋白表达
        (六)免疫荧光实验步骤
        (七)蛋白定量
        (八)超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、GSH及 CAT检测
        (九)ROS检测
    四、统计学方法
    五、实验结果
        (一)人参皂苷Rg1 对人胚肺成纤维细胞MRC-5 增殖的影响
        (二)荧光染色法检测人参皂苷Rg1 对人胚肺成纤维细胞MRC-5 细胞外胶原的影响
        (三)人参皂苷Rg1 对人胚肺成纤维细胞MRC-5 氧化应激的影响
        (四)RT-PCR检测AKT、PI-3K值
        (五)Western blot 检测各组 AKT、P-AKT、PI-3K 的表达水平
    六、实验小结
第二部分 讨论
    一、肺纤维化及其与氧化应激的关系概述
        (一)、肺纤维化概述
        (二)、氧化应激及抗氧化系统概述
    二、中医对肺纤维化的认识及治疗
        (一)病因病机
        (二)中医对肺纤维化的治疗
        (三)中医治疗肺纤维化的优势
    三、PI-3k/Akt信号通路与肺纤维化
    四、人参皂苷Rg1的现代药理作用及临床应用
        (一)抗氧化作用
        (二)抗炎作用
        (三)抗纤维化作用
        (四)抗疲劳作用
        (五)抗肿瘤作用
结语
参考文献
综述
    参考文献
致谢
附件



本文编号：3876194