RanBP7，8基因在TGF-β/BMP信号通路中的功能研究及其对肺成纤维细胞的作用

发布时间：2024-01-31 20:59

　　RNA干扰(RNA interference，RNAi)是指同源双链RNA所引发的特异序列的转录后基因沉默现象，它被证明是一项能有效而特异地抑制基因表达的新技术。本研究中，设计了针对RanBP7和RanBP8的特异siRNA序列，并研究了RanBP7和RanBP8在转化生长因子-β(TGF-β)及骨形成蛋白(BMP)信号通路中的作用，进一步考察了RanBP8在肺纤维化疾病中的作用。 TGF-β的信号转导是由在进化上保守的机制调节的。TGF-β信号通路的关键一步是由TGF-β诱导的Smad蛋白C末端的磷酸化并转运入细胞核定位。RanBP7和RanBP8在转运由TGF-β及BMP激活的Smads进入细胞核中发挥关键作用。应用RNA干扰技术干扰RanBP7和RanBP8蛋白表达后，使响应BMP信号通路的Smad1及响应TGF-β信号通路的Smad2／3在细胞核内的聚集显著减少。因此，我们发现了在TGF-β及BMP信号传导进入细胞核中起着至关重要作用的在进化上保守的新的蛋白质。 RanBP7／8可与Smads相互作用，与Smads的磷酸化状态无关。实验结果还表明基础状态的Smads转运入核可能...

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缩略语
第一章 前言
    1 RNA干扰技术简介及其应用研究进展
        1.1 RNAi的发展史
        1.2 RNAi技术概况
        1.3 RNA干扰的特征
        1.4 RNAi的作用机制
        1.5 RNAi对生物体的意义
        1.6 siRNA的制备方法
        1.7 RNA干扰的应用
    2 TGF-β/BMP信号传导途径
        2.1 TGF-β/Smad信号传导途径及其生物学功能
        2.2 BMP/Smad信号传导途径及其生物学功能
        2.3 配体的结构与功能
        2.4 Ⅰ型和Ⅱ型受体的结构与功能
        2.5 Smads蛋白家族的结构特性及其分组
        2.6 Smads蛋白介导的信号传导
        2.7 Smads蛋白的核内转录活性
    3 肺纤维化概况
        3.1 肺纤维化疾病的分类及特征
        3.2 肺纤维化发病的分子机制
        3.3 肺纤维化的流行病学现状
        3.4 肺纤维化的治疗概况
    4 TGF-β信号通路与肺纤维化的关系
        4.1 拮抗TGF-β1/Smad3信号通路对肺纤维化的防治作用
        4.2 TGF-β信号通路参与肺纤维化发生的机制
    5 RanBP7,8基因介绍
    6 课题立题方向
第二章 RanBP7,8基因在BMP/Smad信号通路中的功能研究
    1 实验材料与仪器
    2 实验方法与步骤
    3 数据处理及统计方法
    4 实验结果
        4.1 RNA水平检测siRNAs对RanBP7和RanBP8基因沉默效果
        4.2 RanBP7和RanBP8基因对Smad1-P蛋白总量的影响
        4.3 RanBP7和RanBP8基因对Smad1-P蛋白分布的影响
        4.4 RanBP7和RanBP8基因对Smad6基因表达的影响
    5 讨论
    6 小结
第三章 RanBP7,8基因在TGF-β/Smad信号通路中的功能研究
    1 实验材料与仪器
    2 实验方法与步骤
    3 数据处理及统计方法
    4 实验结果
        4.1 RanBP7和RanBP8基因对Smad2和Smad3及Smad2-P蛋白总量的影响
        4.2 RanBP7和RanBP8基因对Smad2/3蛋白分布的影响
        4.3 RanBP7和RanBP8基因对Smad7基因表达的影响
        4.4 RanBP7和RanBP8基因对Smads蛋白转运入核效率的影响
    5 讨论
    6 小结
第四章 RanBP7和8与Smads相互作用研究
    1 实验材料与仪器
    2 实验方法与步骤
    3 数据处理及统计方法
    4 实验结果
        4.1 RanBP7、RanBP8与Smad1和Smad2的相互作用
        4.2 RanBP7、RanBP8对基础状态的Smads即未磷酸化的Smads蛋白转运入核的作用
    5 讨论
    6 小结
第五章 RanBP8基因在肺纤维化发生中的作用
    1 实验材料与仪器
    2 实验方法与步骤
    3 数据处理及统计方法
    4 实验结果
        4.1 RanBP8基因对报告基因—虫荧光素酶(luciferase)活性的作用
        4.2 测定RanBP8基因对HLF细胞增值速度的变化
        4.3 测定RanBP8基因对HLF细胞凋亡的变化
    5 讨论
    6 小结
全文结论
参考文献
致谢



本文编号：3891541