硫化氢在运动改善肺纤维化及肺泡上皮细胞衰老中的作用及机制
发布时间：2024-04-11 03:17
研究目的肺纤维化是一种由多种因素导致的进行性发展的肺部疾患,其发病机制至今尚未完全阐明。肺泡II型上皮细胞的衰老与肺纤维化的发病密切相关。运动锻炼已经被广泛认为在疾病预防和康复上是一种安全有效的手段。作为一种重要的气体信号分子,H2S在许多疾病的发生发展过程中具有重要的调控作用,如可以通过逆转人脐静脉内皮细胞及神经元的衰老改善相关疾病。因此,本论文的研究目的是首先探明运动锻炼改善肺纤维化是否与H2S有关,其机制是什么?接着探讨H2S能否逆转肺泡上皮细胞的衰老从而改善肺纤维化。研究方法第一部分:建立BLM诱导的肺纤维化小鼠模型,分别对小鼠进行运动干预和外源性补充H2S处理,Masson染色法观察小鼠肺组织中胶原沉积的情况并统计肺组织中纤维化的面积;ELISA检测肺组织中羟脯氨酸、I型胶原和TGF-β1含量;免疫荧光共染观察上皮细胞标志物E-cadherin和间质细胞标记物α-SMA的表达;Western Blot检测LRP-6/β-catenin信号通路相关蛋白表达;锌捕获法检测小鼠肺组织中内源性H<...
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
中英文名词缩略表
文献综述:硫化氢抗氧化应激的相关机制
第一部分 硫化氢在运动改善小鼠肺纤维化中的作用
1.前言
2.材料与方法
2.1 主要设备与试剂
2.2 实验流程图
2.3 实验动物
2.3.1 实验分组
2.3.2 运动方案及药物用量
2.3.3 小鼠肺纤维化模型制备
3.动物取材与检测指标
3.1 羟脯氨酸(hydroxyproline)的检测
3.2 Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ)和TGF-β的检测
3.3 内源性H2S含量的检测
3.4 Masson染色
3.5 免疫荧光标记E-cadherin和 a-SMA
3.6 蛋白质印记分析(Western Blot Analysis)
4.统计学分析
5.研究结果
5.1 运动改善博莱霉素诱导小鼠肺纤维化
5.2 运动逆转博莱霉素诱导的肺组织EMT
5.3 运动抑制博来霉素诱导的肺组织LRP6/β-catenin信号通路
5.4 运动逆转博来霉素诱导的小鼠肺组织中内源性H2S含量
5.5 H2S抑制博来霉素诱导的肺纤维化
5.6 H2S逆转博来霉素诱导的肺组织EMT
5.7 H2S抑制博来霉素诱导的肺组织LRP6/β-catenin信号通路
6.分析与讨论
7.结论
第二部分 H2S在肺泡上皮细胞衰老中的作用及机制
1.前言
2.研究方法
2.1 细胞的培养与处理
2.2 实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)
2.3 蛋白质印迹分析法(Western Blot)
2.4 SA-β-Gal半乳糖苷酶活性检测
2.5 CCK8法检测细胞增殖
3.统计学分析
4.研究结果
4.1 气管内滴注BLM后不同时间肺纤维化的进行性发展
4.2 BLM诱导肺组织中P53/P21的表达
4.3 BLM对 H2S合成酶CBS和CSE及内源性H2S含量的影响
4.4 气管内滴注BLM后,小鼠肺组织中纤维化的面积、P53及P21蛋白表达量与内源性H2S含量的关系
4.5 离体情况下,Na HS(H2S供体)对BLM诱导P53/P21表达的影响
4.6 离体情况下,NaHS(H2S供体)逆转博来霉素诱导的ATⅡ细胞SA-β-Gal半乳糖苷酶活性
4.7 离体情况下,NaHS(H2S供体)逆转博来霉素诱导的ATⅡ衰老细胞分泌的SASP
4.8 离体情况下,NaHS(H2S供体)抑制成纤维细胞的异常增殖
4.9 在体情况下,腹腔注射NaHS(H2S供体)对BLM诱导的肺组织中P53/P21表达的影响
4.10 在体情况下,腹腔注射NaHS(H2S供体)抑制博来霉素诱导的小鼠肺组织中SASP水平
4.11 MG132逆转H2S对BLM诱导的L2细胞中高表达的P53的抑制作用
5.分析与讨论
6.结论
全文总结
主要参考文献
攻读硕士学位期间学术科研成果
致谢
本文编号：3950791
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
abstract
中英文名词缩略表
文献综述:硫化氢抗氧化应激的相关机制
第一部分 硫化氢在运动改善小鼠肺纤维化中的作用
1.前言
2.材料与方法
2.1 主要设备与试剂
2.2 实验流程图
2.3 实验动物
2.3.1 实验分组
2.3.2 运动方案及药物用量
2.3.3 小鼠肺纤维化模型制备
3.动物取材与检测指标
3.1 羟脯氨酸(hydroxyproline)的检测
3.2 Ⅰ型胶原(collagen Ⅰ)和TGF-β的检测
3.3 内源性H2S含量的检测
3.4 Masson染色
3.5 免疫荧光标记E-cadherin和 a-SMA
3.6 蛋白质印记分析(Western Blot Analysis)
4.统计学分析
5.研究结果
5.1 运动改善博莱霉素诱导小鼠肺纤维化
5.2 运动逆转博莱霉素诱导的肺组织EMT
5.3 运动抑制博来霉素诱导的肺组织LRP6/β-catenin信号通路
5.4 运动逆转博来霉素诱导的小鼠肺组织中内源性H2S含量
5.5 H2S抑制博来霉素诱导的肺纤维化
5.6 H2S逆转博来霉素诱导的肺组织EMT
5.7 H2S抑制博来霉素诱导的肺组织LRP6/β-catenin信号通路
6.分析与讨论
7.结论
第二部分 H2S在肺泡上皮细胞衰老中的作用及机制
1.前言
2.研究方法
2.1 细胞的培养与处理
2.2 实时荧光定量PCR法(Real-time PCR)
2.3 蛋白质印迹分析法(Western Blot)
2.4 SA-β-Gal半乳糖苷酶活性检测
2.5 CCK8法检测细胞增殖
3.统计学分析
4.研究结果
4.1 气管内滴注BLM后不同时间肺纤维化的进行性发展
4.2 BLM诱导肺组织中P53/P21的表达
4.3 BLM对 H2S合成酶CBS和CSE及内源性H2S含量的影响
4.4 气管内滴注BLM后,小鼠肺组织中纤维化的面积、P53及P21蛋白表达量与内源性H2S含量的关系
4.5 离体情况下,Na HS(H2S供体)对BLM诱导P53/P21表达的影响
4.6 离体情况下,NaHS(H2S供体)逆转博来霉素诱导的ATⅡ细胞SA-β-Gal半乳糖苷酶活性
4.7 离体情况下,NaHS(H2S供体)逆转博来霉素诱导的ATⅡ衰老细胞分泌的SASP
4.8 离体情况下,NaHS(H2S供体)抑制成纤维细胞的异常增殖
4.9 在体情况下,腹腔注射NaHS(H2S供体)对BLM诱导的肺组织中P53/P21表达的影响
4.10 在体情况下,腹腔注射NaHS(H2S供体)抑制博来霉素诱导的小鼠肺组织中SASP水平
4.11 MG132逆转H2S对BLM诱导的L2细胞中高表达的P53的抑制作用
5.分析与讨论
6.结论
全文总结
主要参考文献
攻读硕士学位期间学术科研成果
致谢
本文编号：3950791
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/huxijib/3950791.html
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