人IL-10的克隆表达及其对小鼠气道过敏性炎症的作用研究

发布时间：2024-04-25 01:06

　　目的：构建人白细胞介素10(hIL-10)的原核表达载体，应用 大肠杆菌表达hIL-10，并加以纯化，应用于小鼠气道过敏性炎症反 应模型，研究外源性重组人白细胞介素10(rhIL-10)在过敏性炎症中 的作用。 方法：抽取健康成人外周血，分离得到外周血单个核细胞(PBMC)， 应用刀豆素A(Con-A)刺激培养24小时，然后抽提细胞总RNA。通 过RT-PCR方法扩增hIL-10cDNA，将hIL-10cDNA定向克隆于原 核表达载体pBAD/gⅢA，应用PCR方法、酶切分析和序列测定筛选 鉴定阳性克隆。培养筛选出的阳性克隆，应用阿拉伯糖诱导表达 hIL-10，并进行初步纯化。实验小鼠雾化吸入诱导表达的rhIL-10， 观察其在小鼠气道过敏性炎症中的作用。实验小鼠分为3 组，皆于 第1、10天腹腔内注射20μg鸡卵蛋白加2mg的Al(OH)₃，并于第22、 23、24天作如下处理：预防组，致敏前24小时和05小时分别吸入 rhIL-10(10ng)；治疗组，致敏后20分钟吸入rhIL-10(10ng)，对 照组，致敏后20分钟吸入PBS 2ml。对实验小鼠...

【文章页数】：46 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
前 言
第一部分 人白细胞介素10原核表达载体的构建及表达
第二部分 rhIL-10对小鼠气道过敏性炎症的作用研究
参考文献
文献综述
致 谢



本文编号：3963771