骨髓间充质干细胞通过miR-130b减轻LPS对上皮钠通道抑制作用的机制研究

发布时间：2024-05-20 23:21

　　目的:急性肺损伤(acute lung injury,ALI)是一种发病率和死亡率较高的疾病,其特征之一是严重的肺水肿,位于肺泡Ⅱ型上皮细胞(alveolar typeⅡepithelial cells,ATⅡ)顶膜侧的上皮钠通道(epithelail sodium channels,ENaC)对完成肺泡腔内钠水转运和水肿液清除至关重要。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)具有调节组织损伤的免疫反应并促进体内修复的能力,并已被建议作用于多种肺疾病(其中包括ALI),MSCs能够释放多种细胞因子和生长因子,外泌体和微小RNA(microRNAs,miRNAs)等。MiRNAs在生物过程中发挥重要调控作用,此外,它们还与一些肺部疾病的发病机制有关。我们推测小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)可能通过miRNAs影响ATⅡ中ENaC的功能,从而对ALI发挥治疗作用。本实验旨在探讨miRNAs与ENaC之间的关系,明确其是否影响Na+的跨膜转运并探讨其可能的分子机制。研究方法:1、通过CCK-...

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1 前言
2 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 动物和细胞
        2.1.2 试剂
        2.1.3 仪器和材料
        2.1.4 主要溶液配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 小鼠BMSCs的分离与培养
        2.2.2 胎鼠ATⅡ的分离与培养
        2.2.3 H441细胞培养
        2.2.4 CCK-8细胞增殖实验
        2.2.5 Western Blot分析
        2.2.6 qRT-PCR分析
        2.2.7 尤斯灌流实验
        2.2.8 qRT-PCR测定转染效率
        2.2.9 MiRNAs转染ATⅡ
        2.2.10 MiRNAs转染BMSCs及 BMSCs与 ATⅡ细胞共培养
        2.2.11 siRNA特异性敲减PTEN
        2.2.12 统计学分析
3 实验结果
    3.1 BMSCs对 H441 细胞生存能力的影响
    3.2 BMSCs对 ATⅡ细胞中ENaC和 PTEN蛋白表达水平的影响
    3.3 BMSCs对 ATⅡ细胞中ENaC mRNA表达水平的影响
    3.4 BMSCs对 H441 单层细胞短路电流的影响
    3.5 BMSCs对 ATⅡ细胞中miR-130b表达水平的影响
    3.6 MiR-130b的转染效率
    3.7 MiR-130b对 ATⅡ中PTEN和 ENaC蛋白表达的影响
    3.8 BMSCs通过miR-130b对 ATⅡ中PTEN和 ENa C蛋白表达的影响
    3.9 敲减PTEN的表达对ENa C蛋白表达的影响
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3979271