煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动研究

发布时间：2017-06-30 01:03

  本文关键词：煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的研究接尘观察对象、壹期、贰期、叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬活动的变化情况，探讨自噬活动与煤矿粉尘所致肺部纤维化病变之间关系，并阐述其可能的调节机制。 方法选取在中国煤矿工人北戴河疗养院进行大容量全肺灌洗，经尘肺诊断专家组确诊患有煤工尘肺的患者116例，并排除患有肺部相关的疾病（如肺炎，肺癌，活动性肺结核等），尘肺伴发肺部并发症及患有严重心肺疾病及传染病的煤工尘肺患者为研究对象。收集其肺灌洗液，经纯化后得到肺巨噬细胞，用透射电子显微镜观察其自噬相关结构的形态，包括自噬前体、自噬体、溶酶体和自噬溶酶体。采用蛋白免疫印迹方法检测自噬标志性蛋白LC3及自噬调控蛋白beclin1、mTOR和p-mTOR的表达量，分析接尘观察对象、壹期、贰期、叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动的强弱变化。根据研究对象接尘量的不同分组，分析接尘量对肺巨噬细胞自噬活动的影响。根据研究对象是否脱尘，将研究对象分为间断接尘组和持续接尘组，分析脱离粉尘作业对肺巨噬细胞自噬活动的影响。根据脱尘年限的不同分组，分析脱尘时间长短对肺巨噬细胞自噬活动的影响。 结果本研究中，接尘观察对象、壹期、贰期、叁期的煤工尘肺患者均为男性、汉族。研究对象的平均年龄为（47.50±6.53）岁（27~64岁）。工种包括采煤工、开拓工、掘进工、运输工、维修工等。叁期煤工尘肺患者的平均接尘年限比接尘观察对象和壹期煤工尘肺患者长。各期煤工尘肺患者的年龄、吸烟率、脱尘率及脱尘年限比较差别无统计学意义。电镜观察发现不同期别煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬活动不同，贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞中自噬体较壹期增多，但叁期煤工尘肺患者中的自噬体较贰期减少。贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达量高于壹期，叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1表达量低于贰期，并且叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞LC3Ⅱ/Ⅰ表达量高于壹期，贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞Beclin1表达量高于接尘观察对象。贰期煤工尘肺患者肺巨噬细胞mTOR和p-mTOR表达量低于接尘观察对象和壹期，叁期煤工尘肺患者肺巨噬细胞mTOR和p-mTOR表达量高于贰期。接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达量低于接尘21~30年的煤工尘肺患者，接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中Beclin1的表达量低于接尘0~10年的煤工尘肺患者，接尘31~40年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中mTOR和p-mTOR的表达量高于接尘21~30年的煤工尘肺患者。比较间断接尘与持续接尘组自噬相关蛋白的表达量，结果显示间断接尘组LC3Ⅱ/Ⅰ表达量较持续接尘组高，间断接尘组mTOR和p-mTOR的表达量较持续接尘组低。脱尘1~10年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ和Beclin1的表达量低于脱尘11~20年的煤工尘肺患者。脱尘1~10年的煤工尘肺患者肺泡巨噬细胞中mTOR和p-mTOR的表达量高于脱尘11~20年的煤工尘肺患者。 结论自噬活动减弱可能是影响尘肺肺纤维化进展的原因之一。接尘时间过长会导致肺巨噬细胞自噬活动减弱。接尘工人脱离粉尘作业后肺巨噬细胞自噬活动有恢复的迹象，并且脱尘时间较长的煤工尘肺患者其肺泡巨噬细胞自噬活动较强。
【关键词】：煤工尘肺 肺巨噬细胞 自噬 肺纤维化
【学位授予单位】：河北联合大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R135.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文缩略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 调查研究13-37
• 1.1 调查对象13
• 1.2 现场调查方法13
• 1.3 实验试剂与仪器13-17
• 1.3.1 主要实验试剂13-15
• 1.3.2 主要试剂的配制15-16
• 1.3.3 主要仪器和设备16-17
• 1.4 实验方法17-21
• 1.4.1 巨噬细胞纯化17
• 1.4.2 透射电镜观察17-18
• 1.4.3 Western blot 分析18-21
• 1.5 统计分析21
• 1.6 结果21-29
• 1.6.1 不同期别煤工尘肺患者一般情况和职业史21-22
• 1.6.2 透射电子显微镜观察肺巨噬细胞自噬活动22
• 1.6.3 不同期别煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬相关蛋白表达情况22-27
• 1.6.4 不同接尘年限的煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动情况27
• 1.6.5 间断接尘与持续接尘煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动比较27-28
• 1.6.6 不同脱尘年限的煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动分析28-29
• 1.7 讨论29-33
• 1.8 结论33
• 参考文献33-37
• 第2章 综述 自噬与器官纤维化37-49
• 2.1 自噬37
• 2.2 自噬的功能37-39
• 2.2.1 自噬的生理功能38
• 2.2.2 自噬的病理功能38-39
• 2.3 自噬与纤维化39-43
• 2.3.1 自噬在心肌纤维化中的作用39-40
• 2.3.2 自噬在肝纤维化中的作用40
• 2.3.3 自噬在肺纤维化中的作用40-41
• 2.3.4 自噬在肾纤维化中的作用41-42
• 2.3.5 自噬在皮肤成纤维细胞中作用42-43
• 2.3.6 自噬在其他组织器官纤维化中的作用43
• 2.4 结语43-44
• 参考文献44-49
• 致谢49-50
• 导师简介50-51
• 作者简介51-52
• 学位论文数据集52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 何韬;王海杰;谭玉珍;;自噬在细胞存活和死亡中的作用[J];生理科学进展;2008年01期

2 赵婷婷;古艳婷;李平;朱斌;董f^;张浩军;;Decorin基因过表达对HEK 293T细胞微管相关蛋白LC3和自噬基因beclinl表达的影响[J];中日友好医院学报;2012年06期

中国博士学位论文全文数据库 前1条

1 桂耀松;mTOR信号通路参与肺纤维化发病的机制研究[D];北京协和医学院;2013年

  本文关键词：煤工尘肺患者肺巨噬细胞自噬活动研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：499965