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IL-33在粉尘螨Ⅰ类变应原诱发的过敏性哮喘中的作用研究

发布时间:2017-08-03 07:01

  本文关键词:IL-33在粉尘螨Ⅰ类变应原诱发的过敏性哮喘中的作用研究


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【摘要】:目的:研究IL-33在粉尘螨I类变应原Der f1诱发的过敏性哮喘中的作用。方法:1.大剂量表达并纯化粉尘螨I类变应原Der f1蛋白。2.制备Der f1诱发的哮喘小鼠模型:将40只SPF级BALB/c雌性小鼠随机分为哮喘组、PBS组、免疫治疗组和抑制剂组四组,每组10只。除PBS组外,其余三组分别在第0、7、14天经小鼠腹腔注射致敏液,同时给予抑制组小鼠腹腔注嘌呤抑制剂PPADS。第21天起,除PBS组外,其余三组分别雾化吸入上述致敏液,PBS组则用PBS液雾化吸入,每天雾化30min,1次/天,连续7天。PBS组小鼠用PBS腹腔注射和滴鼻激发。在完成最后一次雾化24小时后处死小鼠,集取每组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清,并计数BALF中嗜酸性粒细胞(EOS),取小鼠肺组织制作病理切片。ELISA检测BALF中IL-5、IL-13、IFN-γ和IL-33的含量及血清中特异性IgE和IgG2a水平。用Western-blot法检测肺组织中IL-33蛋白的表达变化。结果:SDS-PAGE和Western bloting说明了Der f1蛋白表达纯化成功;肺组织病理切片镜检说明,免疫治疗组和抑制剂组小鼠均比哮喘组炎症明显好转,炎症细胞浸润减少。小鼠BALF中EOS结果为抑制剂组和免疫治疗组嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组(P0.01)。BALF中IL-5、IL-13及IL-33细胞因子含量免疫治疗组和抑制剂组明显低于哮喘组(P0.01),而IFN-γ的变化则相反,免疫治疗组明显比于哮喘组高(P0.01)。血清中特异性IgE含量结果为免疫治疗组和抑制剂组明显要比哮喘组低(P0.01),IgG2a变化与IgE变化正好相反,免疫治疗组明显高于哮喘组(P0.01)。哮喘组小鼠肺组织中IL-33蛋白的表达情况明显高于其他组。结论:成功表达纯化Der f 1蛋白;IL-33在Der f1诱发的过敏性哮喘中可能发挥着重要的作用。
【关键词】:粉尘螨 Der f1蛋白 过敏性哮喘 IL-33
【学位授予单位】:皖南医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R562.25
【目录】:
  • 中英文缩略词对照表5-9
  • 摘要9-11
  • Abstract11-13
  • 前言13-14
  • 第一部分 粉尘螨Ⅰ类变应原Der f1蛋白表达和纯化14-29
  • 1.研究内容14-15
  • 2.材料与方法15-25
  • 2.1 材料与试剂15-21
  • 2.2 实验方法21-25
  • 3.结果25-28
  • 3.1 Der f1蛋白表达与纯化25-26
  • 3.2 免疫印迹实验鉴定Western blotting26-28
  • 4.讨论28-29
  • 第二部分 IL-33在粉尘螨Ⅰ类变应原诱发的过敏性哮喘中的作用研究29-40
  • 1.研究内容29
  • 2.材料与方法29-33
  • 2.1 材料与试剂29-31
  • 2.2 实验方法31-33
  • 3.结果33-38
  • 3.1 各组小鼠症状和体征的改变33-34
  • 3.2 BALF中EOS分类计数分析34
  • 3.3 BALF中细胞因子IFN-γ、IL-5、IL-13和IL-33的变化34-35
  • 3.4 肺组织病理结果35-36
  • 3.5 血清变应原特异性IgE、IgG2a的水平变化36-37
  • 3.6 肺组织中IL-33蛋白表达分析37-38
  • 4.讨论38-40
  • 结论40-41
  • 创新点41-42
  • 参考文献42-49
  • 综述 尘螨与过敏性哮喘49-57
  • 参考文献53-57
  • 作者简介及读研期间主要科研成果57-58
  • 致谢58

【参考文献】

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本文编号:613082

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