尘螨促进DCs TIM4的表达以及诱导Th2细胞分化的研究

发布时间：2017-08-17 21:20

  本文关键词：尘螨促进DCs TIM4的表达以及诱导Th2细胞分化的研究

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【摘要】：目的： 体外研究尘螨(House dust mite,HDM)是否通过诱导小鼠骨髓来源成熟树突状细胞(mature Dendritic cells,mDCs)T细胞免疫球蛋白域和粘液素样域-4(TIM4)的表达,进而促进初始T细胞分化为Th2细胞。 方法： 1.分离、培养小鼠骨髓来源的mDCs,显微镜下观察其生长、变化,流式细胞仪测定细胞表面分子CD11C、CD80、MHC-II、CD86对细胞进行鉴定； 2.培养的mDCs分为四组：空白对照组(0U/ml HDM)\100U/ml HDM刺激组、200U/ml HDM刺激组、400U/ml HDM刺激组,DCs与不同浓度HDM共同培养48h,收集HDM刺激后的DCs,分别用流式细胞仪、Western Blotting检测各组中TIM4的表达； 3.将空白对照组、400U/ml HDM刺激组的DCs与小鼠初始T淋巴细胞共同培养48h,ELISA法测定混合培养细胞上清液中细胞因子IL-4及IFN-γ的表达,说明HDM对Th2细胞分化的影响。 结果： 1.收集培养第10天的DCs,流式细胞仪测定CD11C、CD80、MHC-II、CD86分子表达率分别为(95.18±1.20)%、(85.07±2.05)%、(90.85±1.24)%、(70.78±1.57)%。提示所培养的细胞为mDCs； 2.不同浓度HDM刺激DCs48h后,分别用流式细胞仪和Western Blotting测定TIM4的表达。流式细胞仪测定不同组TIM4+细胞百分比分别为：(5.01±3.02)%、(12.78±1.57)%、(24.17±2.45)%、(55.85±2.24)%,与空白对照组相比,HDM刺激组TIM4表达水平均升高,差异具有统计学意义(P0.05)。Western Blotting结果同样说明两组间差异具有统计学意义(P0.05)； 3.ELISA法检测经不同浓度HDM刺激后DCs与初始T细胞混合培养上清液中IL-4及IFN-γ的表达水平,空白对照组、4OOU/ml HDM组IL-4水平分别为(2.52±2.80)pg/ml、(43.10±5.20)pg/ml, IFN-y水平分别为(90.37±3.74)pg/ml、(38.74±3.67)pg/ml。结果显示经HDM作用后IL-4表达明显升高(P0.05),而IFN-γ表达降低(P0.05),差异具有统计学意义。结论： 小鼠骨髓来源的mDCs经HDM刺激后TIM4表达水平升高,且呈一定的剂量依赖性,TIM4+DCs可促使初始T细胞活化并分化为Th2细胞。
【关键词】：树突状细胞 T细胞免疫球蛋白域和粘液素样域-4 Th2细胞 特应性疾病
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R765.21;R562.25
【目录】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩略词表9-10
• 前言10-12
• 材料12-14
• 方法14-19
• 结果19-23
• 讨论23-25
• 参考文献25-28
• 综述28-37
• 参考文献33-37
• 个人简历37-38
• 致谢38

【参考文献】

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3 赵长青;索利敏;何韶衡;杨平常;;树突状细胞参与呼吸道过敏性疾病的研究进展[J];临床耳鼻咽喉头颈外科杂志;2011年12期

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本文编号：691170