肺孢子菌动物模型的建立及病原学和分子生物学检测技术研究

发布时间：2017-08-22 10:35

  本文关键词：肺孢子菌动物模型的建立及病原学和分子生物学检测技术研究

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【摘要】：目的建立肺孢子菌动物模型,并对肺孢子菌病原学和分子生物学检测技术进行研究。方法 SD和Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,实验组大鼠皮下注射地塞米松,对照组皮下注射生理盐水。诱导8周后处死全部大鼠,收集其支气管肺泡灌洗液(BALF)和肺组织,分别做涂片和肺印片,染色后镜检。用FTA卡采集所有大鼠的BALF进行PCR检测。对PCR产物进行测序,利用BLAST软件将测序结果与Gen Bank数据库中的鼠源性肺孢子菌进行比对,确定菌种。结果共采集肺组织标本和BALF各34份,病原学检测显示实验组总感染率为29.2%(7/24),对照组感染率为0;其中SD和Wistar大鼠实验组感染率分别为25.0%(3/12)和33.3%(4/12),差异无统计学意义(P=0.31);实验组SD大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别为25.0%(3/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.34)。实验组Wistar大鼠肺印片和BALF肺孢子菌阳性检出率分别33.3%(4/12)和16.7%(2/12),差异无统计学意义(P=0.24)。用PCR方法共检测28份大鼠BALF样本,实验组阳性检出率为91.7%(26/28),对照组均为阴性。对PCR产物进行测序分析,发现其与Gen Bank已登录的大鼠源肺孢子菌(JX499145、GU133622、EF646865)的同源性均为100%。结论通过皮下注射地塞米松可以建立肺孢子菌动物模型,SD大鼠与Wistar大鼠在作为肺孢子菌动物模型的选择上无显著差别。在早期感染阶段,适宜用PCR法进行肺孢子菌检测,病原形态学检测漏检率高。
【作者单位】： 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 世界卫生组织疟疾、血吸虫病和丝虫病合作中心 卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室;
【关键词】： 肺孢子菌 动物模型 病原检测 PCR检测
【基金】：国家科技重大专项(2012ZX1004-220) 国家自然科学基金(81473022)
【分类号】：R-332;R519
【正文快照】： 肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)是由机会性致病病原体肺孢子菌(Pneumocystis jirove-ci)感染引起的,主要见于免疫功能缺陷者或免疫力低下的人群,是艾滋病感染者和肿瘤放化疗患者的常见并发症和主要死因[1-3]。PCP临床症状和体征不明显,易漏诊,早期发现和诊断可有效

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本文编号：718644