在特发性肺纤维化发生中LncRNA-TERRA对AECs-Ⅱ端粒的调控作用

发布时间：2017-10-06 05:10

  本文关键词：在特发性肺纤维化发生中LncRNA-TERRA对AECs-Ⅱ端粒的调控作用

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【摘要】：目的：目前关于特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)的具体发病机制仍未研究明确,其治疗在国际上没有统一的规范。氧化损伤是IPF发病机制之一,其中Ⅱ型肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelial cells, AECs-Ⅱ)的氧化损伤／凋亡是IPF发生的始动事件,在IPF的发病及发展中起着重要的作用。IPF是一种典型的老年性疾病。端粒的长度与衰老密切相关。端粒随着染色体的不断复制,长度变短,当缩短到不能保护染色体时,细胞分裂就会停止,随后细胞发生凋亡。端粒的长度由端粒酶维持。LncRNA-TERRA具有抑制端粒酶活性的作用,本论文通过探讨LncRNA-TERRA在IPF中的调控机制,为治疗IPF的提供靶点。方法：采用H_2O_2诱导A549建立IPF氧化损伤模型；使用TGF-β刺激A549、 HLF构建IPF转分化模型模型。通过real-time PCR检测LncRNA-TERRA在IPF患者及细胞模型中的表达变化。RNA干扰技术沉默LncRNA-TERRA的表达。使用FITC/PI凋亡试剂盒染色细胞检测细胞凋亡率。real-time PCR测定p53、bax、 bel-2的表达。CCK-8检测细胞增殖。端粒酶活性使用TRAP试剂盒实时定量测定。Western blot检测TERT, Cyclin D1、Cyclin E、PCNA的表达。结果：LncRNA-TERRA在IPF中表达上调。在氧化损伤中,沉默LncRNA-TERRA的表达,细胞凋亡降低,p53、bax表达下调,bcl-2表达上调；干扰LncRNA-TERRA的表达,细胞增殖率升高,PCNA表达上调；敲除LncRNA-TERRA后,Cyclin D1、E表达上调。在氧化损伤中,端粒酶活性下降,TERT表达下调；当沉默LncRNA-TERRA后,端粒酶的活性升高,TERT表达上调。结论：LncRNA-TERRA通过抑制端粒酶的活性,缩短端粒长度,细胞再生能力下降,不能完成有效的自身修复,引起IPF的发生。
【关键词】：特发性肺纤维化 LncRNA-TERRA 端粒 氧化损伤 转分化
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563
【目录】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-7
• 英文缩略词索引7-8
• 前言8-12
• 第一部分 LncRNA-TERRA在IPF中的表达变化12-27
• 1. 前言13
• 2. 材料与方法13-20
• 3. 结果20-25
• 4. 讨论25-27
• 第二部分 LncRNA-TERRA在IPF中的功能研究27-47
• 1. 前言28
• 2. 材料与方法28-39
• 3. 结果39-44
• 4. 讨论44-47
• 第三部分 LncRNA-TERRA在IPF中的调控机制47-56
• 1. 前言48
• 2. 材料与方法48-52
• 3. 结果52-54
• 4. 讨论54-56
• 参考文献56-63
• 综述63-70
• 参考文献67-70
• 硕士就读期间发表及待发表的文章70-71
• 致谢71

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 王辉;陈雪芬;魏路清;;肺纤维化发病机制新进展[J];武警后勤学院学报(医学版);2013年01期

2 薛万涛;刘建秋;孔建新;;特发性肺纤维化的治疗[J];中国民族民间医药;2012年11期

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本文编号：980884