mTOR通路在氯化亚铁诱导的外伤性癫痫大鼠模型额叶皮质及海马中的表达研究

发布时间：2017-04-05 18:07

  本文关键词：mTOR通路在氯化亚铁诱导的外伤性癫痫大鼠模型额叶皮质及海马中的表达研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:1.通过观察氯化亚铁皮质注射诱导外伤性癫痫(Posttraumatic Epilepsy,PTE)大鼠模型海马、损伤灶周围皮质p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)的动态表达,了解大鼠PTE后这些区域m TOR通路的激活情况及大鼠癫痫发作情况。2.以m TOR抑制剂雷帕霉素对以上途径进行干预,并对照p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)的表达变化及大鼠癫痫发作情况,探讨PTE可能的防治机制。方法:1.健康成年雄性SD大鼠74只,采用随机数字表法分为正常对照组(A)、生理盐水对照组(B)和癫痫模型组(C)。通过皮质注射氯化亚铁(0.1mol/L,10u L)制作PTE模型。观察行为学及癫痫发作情况,在不同时间点取脑,分别行HE染色、抗p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)酶标免疫组织化学染色,借助专业图像分析软件,对海马、损伤灶周围皮质行病理学观察。2.健康成年雄性SD大鼠69只,采用随机数字表法分为载体治疗组(D)和雷帕霉素治疗组(E)。E组制模成功后腹腔内注射稀释于5%Tween80,5%PEG 400和4%的乙醇载体溶液的雷帕霉素(6mg/kg/d),D组腹腔注射相同体积的不含雷帕霉素的5%Tween80,5%PEG 400和4%的乙醇载体溶液,观察行为学及癫痫发作情况,在不同时间点取脑,分别行HE染色、抗p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)酶标免疫组织化学染色,观察雷帕霉素治疗后对PTE后海马、损伤灶周围病理重构的影响。结果:1.共制模成功105只,制模总成功率85.7%。C组制模后癫痫发作次数逐渐增多,1w时累计癫痫发作次数明显增多,1w后发作累计发作次数逐渐减少。E组癫痫发作次数较D组癫痫发作次数明显减少(P0.05)。2.A组海马齿状回及额叶细胞结构层次清晰未见神经元变性坏死改变;C组较B组海马齿状回及额叶损伤灶周围病理改变严重,颗粒细胞坏死\增生、神经元坏死\增生及胶质细胞增生明显。A组海马齿状回p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)均有少量表达,B组和C组p-m TOR(Ser2448)表达在1w时表达最强,2w时降低,4w时又开始升高,各组同一时间点之间差异均有统计学意义(P0.05);p-P70S6K(Thr389)C组表达在1w时表达最强,2w时降低,4w时又开始升高,B组和C组1h、24h、1w、4w组同一时间点之间差异均有统计学意义(P0.05)。A组p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)均有少量表达,B组和C组损伤灶周围皮质p-m TOR(Ser2448)表达在1w时表达最强,2w时降低,4w时又开始升高,各组同一时间点之间差异均有统计学意义(P0.05),损伤灶周围皮质p-P70S6K(Thr389)的表达,各组同一时间点之间差异也有统计学意义(P0.05)。3.E组较载体治疗组海马齿状回及损伤灶周围病理损伤减轻。E组海马齿状回及损伤灶周围p-m TOR(Ser2448)表达较同一时期D组相关指标的表达减弱,差异具有统计学意义(P0.05)。E组海马齿状回及损伤灶周围p-P70S6K(Thr389)表达较同一时期D组相关指标的表达减弱,E组和D组治疗组1h、24h、1w、4w组同一时间点之间差异均有统计学意义(P0.05),2w之间差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.皮质注射氯化亚铁(0.1mol/L,10u L)后大鼠海马齿状回及损伤灶周围神经元及胶质细胞的相关指标p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)表达增强。通过m TOR通路诱导海马齿状回颗粒细胞、损伤灶周围皮质神经元及胶质细胞等异常增殖,在该模型晚期PTE的发病机制中可能起作用。2.m TOR抑制剂雷帕霉素可减少大鼠PTE模型癫痫发作次数,抑制海马及损伤灶周围皮质相关特异性指标p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)的异常表达。可能影响海马齿状回及损伤灶周围皮质病理重构过程,从而在该模型晚期PTE的防治中起一定作用。
【关键词】：外伤性癫痫 氯化亚铁 海马齿状回 额叶损伤灶 雷帕霉素
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R742.1;R-332
【目录】：

• 英文错略词4
• Racine 分级4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 第一部分 外伤性癫痫大鼠海马、损伤灶周围p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)的表达及意义12-46
• 引言12
• 材料与方法12-20
• 结果20-42
• 讨论42-46
• 第二部分 雷帕霉素对外伤性癫痫大鼠海马、损伤灶周围p-m TOR(Ser2448)、p-P70S6K(Thr389)的表达的影响46-74
• 引言46
• 材料与方法46-51
• 结果51-71
• 讨论71-74
• 结论74-75
• 参考文献75-80
• 综述80-99
• 参考文献91-99
• 致谢99-100

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 林元相,徐如祥,康德智;抗氧化剂防治外伤性癫痫的研究进展[J];中华神经医学杂志;2005年05期

2 韩莹;史道华;;mTOR的构效关系[J];福州总医院学报;2005年Z1期

3 陈伟观;高志伟;倪耀辉;;颅脑外伤致外伤性癫痫的临床分析[J];交通医学;2011年03期

4 ;Neural stem cell activation and glial proliferation in the hippocampal CA3 region of posttraumatic epileptic rats[J];Neural Regeneration Research;2011年16期

5 邹金凯;车宁;孙春华;;mTOR功能及其抑制剂研究进展[J];现代肿瘤医学;2008年10期

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本文编号：287453