细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究

发布时间：2017-04-19 18:01

  本文关键词：细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探索涵盖凋亡不同阶段的较佳检测方法,为选择适当方法全面、准确检测凋亡率提供参考依据。方法选取地塞米松(Dexamethasone,DEX)体内及体外分别诱导小鼠胸腺细胞凋亡为实验模型,采用流式细胞术(Flow Cyto Metry,FCM)及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法对处于不同凋亡阶段的胸腺细胞凋亡率进行检测分析,并采用紫外照射的方法诱导胸腺细胞死亡作为对照来检测各种凋亡检测方法对凋亡率检测的准确性进行进一步的验证评估。结果1、Annexine V联合7-AAD染色流式细胞分析对于早期凋亡胸腺细胞的检测不仅具有高度灵敏性,而且可有效区分凋亡与坏死细胞,能够较好地适用于凋亡率的准确判断。但当凋亡中、晚期细胞膜严重受损乃至细胞破碎时,其对凋亡与坏死细胞的鉴别能力较差,不能有效反映真实凋亡率。2、琼脂糖凝胶电泳检测DNA Ladder可用于凋亡各阶段细胞的定性和定量分析,尤其是对凋亡晚期细胞解体后的DNA碎片,具有独到的适用性。3、Caspase-3流式及TUNEL镜下检测均适用于细胞结构完整时的凋亡定性或定量检测,但Caspase-3在早期检测灵敏度方面相对弱于Annexine V,而TUNEL染色假阳性较高且镜下计数人为因素易导致较大误差。结论凋亡检测方法很多,对于不同凋亡阶段的细胞,每种方法都有其优点及不足。为全面和准确地评估细胞凋亡率,最好选取两种以上互补的方法联合检测。对各期凋亡不确切的较为复杂样本,Annexine V流式检测与DNA Ladder定量分析结合是一种较好的选择。
【关键词】：细胞凋亡率 琼脂糖凝胶电泳法 流式细胞术
【学位授予单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R392
【目录】：

• 中文论著摘要4-6
• 英文论著摘要6-8
• 英文缩略语表8-9
• 前言9-10
• 实验材料与方法10-15
• 实验结果15-23
• 讨论23-28
• 结论28-29
• 本研究创新性的自我评价29-30
• 参考文献30-33
• 附录33-46
• 一、文献综述33-43
• 参考文献39-43
• 二、在校期间科研成绩43-44
• 三、致谢44-45
• 四、个人简介45-46

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 鱼兵,范清宇,闫露,龙华,文艳华;GFP共表达的重构型Caspase-3基因对人成骨肉瘤细胞的凋亡诱导作用[J];中国医师杂志;2004年12期

2 余晓林,刘红,陈万平,程鹏远;GFP共表达的重构型Caspase-3基因对Hep-2细胞的作用[J];第四军医大学学报;2005年21期

3 王晓侠;姚小宝;嵇宪生;朱宏亮;;重构型Caspase-3基因对CNE2细胞的作用[J];南方医科大学学报;2009年01期

4 吴昊昊;王洁;陈宇桦;陈树壮;俞家华;刘芬菊;;凝溶胶蛋白在C57BL/6小鼠急性放射肺损伤中的表达[J];辐射研究与辐射工艺学报;2013年05期

5 蒋凯;权毅;潘显明;;光动力学疗法对肿瘤细胞信号传导通路作用的研究进展[J];西南军医;2008年06期

6 赵长林;殷江霞;刘贤奎;徐惠绵;;膀胱癌Survivin和VEGF的表达与血管生成关系的研究[J];临床肿瘤学杂志;2007年12期

7 刘琦;吴刚;叶陈毅;杨宇;别俊;邓丽;;冬凌草甲素诱导急性淋巴细胞白血病Molt-4细胞凋亡及其机制[J];华西医学;2013年06期

8 裴志勇;赵玉生;高伟;尹巧香;;地黄低聚糖对过氧化氢-血清饥饿诱导的脂肪组织来源干细胞凋亡的影响[J];中国临床保健杂志;2014年05期

9 田鹏;刘琦;李一飞;杨宇;张玉红;吴刚;;组蛋白乙酰化/去乙酰化在冬凌草甲素诱导Molt-4细胞凋亡中的作用[J];激光杂志;2013年03期

10 李正yN;王云东;郭素红;姜晓明;庄文越;;MDA-7/IL-24对乳腺癌MDA-MB-231细胞生长抑制和凋亡的影响[J];基础医学与临床;2012年07期

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 李杨;桦木醇诱导的人源癌细胞凋亡过程中Bax、Bak以及Caspase-9重要调控作用的研究[D];吉林大学;2011年

2 雷学成;前癃通胶囊对良性前列腺增生的临床观察和大鼠前列腺IGF-ⅠmRNA/IGF-ⅠRmRNA、Fas/Fas1表达的影响[D];湖南中医药大学;2011年

3 宋向荣;三氯异氰尿酸对SD大鼠睾丸结构和功能的影响[D];延边大学;2011年

4 孙玲;hTERT及c-myc基因反义寡核苷酸对HL-60细胞的抑制作用[D];郑州大学;2005年

5 蒋凯;三羟异黄酮对光动力学疗法抗肿瘤治疗的增效作用及机制研究[D];第三军医大学;2005年

6 宫大鑫;Survivin在肾癌组织中的表达及Survivin反义寡核苷酸诱导肾癌细胞凋亡及机制的研究[D];中国医科大学;2006年

7 姚如永;海洋活性物质—泥蚶多肽的研究与应用[D];中国海洋大学;2006年

8 杨晓苏;应用SMA细胞模型探讨SMN蛋白对神经元的保护作用及其机制[D];中南大学;2007年

9 陈丹;溴氰菊酯神经细胞凋亡信号转导机制的研究[D];华中科技大学;2006年

10 侯武刚;NDRG2在大鼠睾丸发育中的表达及其与生精细胞凋亡的关系[D];第四军医大学;2009年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 张云良;胃癌组织中BRMS1，GELSOLIN，，uPA蛋白表达及意义研究[D];泰山医学院;2010年

2 李净兵;苯巴比妥对大鼠额叶、顶叶、小脑神经元及神经胶质细胞凋亡的影响[D];河北医科大学;2011年

3 冯璐璐;伏马菌素B_1和黄曲霉毒素B_1联合诱导Vero细胞凋亡的研究[D];南京农业大学;2010年

4 焦利飞;有机磷农药毒死蜱低剂量重复染毒致雄性大鼠生殖毒性及其作用机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

5 李哲;青蒿琥酯的抗癌作用及机理研究[D];辽宁师范大学;2004年

6 刘建敏;凋亡抑制基因survivin在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与Bcl-2蛋白表达的相关性的研究[D];天津医科大学;2005年

7 张丽;氯化镉和硫酸镍联合慢性染毒对大鼠睾丸曲细精管的影响[D];暨南大学;2006年

8 彭洪海;酒精对胎鼠海马神经细胞凋亡影响的实验研究[D];山东大学;2007年

9 杨玲;蓝靛果提取物抗氧化及抗癌作用的研究[D];东北林业大学;2009年

10 漆勇;血浆凝溶胶蛋白在脓毒症发生发展中的作用研究[D];浙江大学;2008年

  本文关键词：细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：316804