Gefitinib对骨外膜间充质干细胞和骨髓间充质干细胞生物学功能的影响

发布时间：2021-05-18 13:52

　　目的探讨表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor, EGFR）信号通路抑制剂Gefitinib对骨外膜间充质干细胞（periosteum mesenchymal stem cells, PMSCs）和骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs）生物学功能的影响。方法将10只健康雄性SD大鼠随机分为实验组（n=5）和对照组（n=5）,均予以制备股骨闭合骨折模型。实验组给予Gefitinib灌胃（100 mg/kg·d）,对照组给予相同剂量甲基纤维素灌胃。术后1周在麻醉状态下处死大鼠并分离提取股骨BMSCs和PMSCs,通过流式细胞术鉴定细胞表面分化抗原群（cluster of differentiation, CD）29、CD34、CD45、CD90;成纤维样细胞集落形成单位（colony forming unit-fibroblast, CFU-F）检测形成沉淀的碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）染色阳性细胞数及沉淀直径大小;5-溴-2-脱氧尿苷（5-Bro... 

【文章来源】：华南国防医学杂志. 2020,34(05)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 试剂
    1.3 仪器
    1.4 方法
        1.4.1 分组与造模
        1.4.2 PMSCs和BMSCs的分离提取与培养
        1.4.3 流式细胞学技术鉴定干细胞表型
        1.4.4 成纤维样细胞集落形成单位(colony forming unit-fibroblast, CFU-F)及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色
        1.4.5 BrdU检测细胞增殖能力
        1.4.6 Von Kossa染色和阿尔新蓝染色
        1.4.7 qPCR检测细胞周期因子、成骨分化及成软骨化相关基因
    1.5 统计学处理
2 结果
    2.1 流式细胞鉴定干细胞表面标志物
    2.2 成纤维样细胞CFU-F检测
    2.3 BrdU检测干细胞增殖能力
    2.4 多向诱导分化鉴定
    2.5 qPCR法检测细胞周期抑制因子相关基因的表达
    2.6 qPCR法检测成骨分化和成软骨分化相关基因的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]吉非替尼对骨折愈合中Ⅰ、Ⅱ及Ⅹ型胶原基因表达的影响[J]. 袁功武,兰生辉,曾文波,刘曦明,聂宇.  中国矫形外科杂志. 2018(10)
[2]表皮生长因子受体信号通路抑制剂吉非替尼对大鼠股骨骨折愈合的影响[J]. 袁功武,兰生辉,聂宇,刘曦明.  中华创伤杂志. 2018 (05)
[3]抑制表皮生长因子受体信号通路对大鼠股骨骨折愈合的作用[J]. 袁功武,兰生辉,刘曦明.  中华实验外科杂志. 2018(04)
[4]Reduced EGFR signaling enhances cartilage destruction in a mouse osteoarthritis model[J]. Xianrong Zhang,Ji Zhu,Fei Liu,Yumei Li,Abhishek Chandra,L Scott Levin,Frank Beier,Motomi Enomoto-Iwamoto,Ling Qin.  Bone Research. 2014(03)
[5]大鼠股骨闭合骨折模型的制作[J]. 周晓中,董启榕,张健.  东南大学学报(医学版). 2007(01)



本文编号：3193908