新型鼠疫疫苗F1抗原原液性质的研究

发布时间：2021-08-18 20:06

　　目的新型鼠疫疫苗包含鼠疫减毒菌EV株培养提取的天然F1抗原。研究生理氯化钠溶液中F1抗原的生物与理化性质、结构概况及聚合状态等特性,以期对F1抗原的制备、质量控制及其免疫原性研究提供理论依据。方法①过碘酸-希夫（PAS）染色法、糖蛋白碳水化合物估测试剂盒鉴定F1抗原是否为糖蛋白,蒽酮-硫酸法定量测定F1抗原中多糖含量,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）技术测定F1抗原单体相对分子质量并与理论值差异比对,间接证明F1抗原是否糖基化;②高效分子排阻色谱法联用多角度激光散射（HPSEC-MALLS）法研究保存于生理氯化钠溶液中F1抗原的天然聚集状态;③搜索GeneBank获得鼠疫菌F1抗原的核苷酸序列,经DNAStar软件翻译出氨基酸序列,并通过肽段覆盖率验证成熟F1抗原的氨基酸序列,以圆二色谱试验结合K2D2软件推测二级结构,MALDI-TOF-MS测定单体相对分子质量。结果①鉴定出F1抗原单体相对分子质量为15 500的蛋白质,不含有多糖成分;②F1抗原的相对分子质量分布范围在10⁶～10⁷之间,呈现聚集状态;③F1抗... 

【文章来源】：微生物学免疫学进展. 2020,48(03)

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【部分图文】：

染色法鉴定糖蛋白

MALDI-TOF-MS测定F1抗原的单体相对分子质量为15 562,与理论值15 563相一致。即F1抗原为不含多糖成分的蛋白质,见图2。2.2 F1抗原的天然状态研究

结果显示, F1抗原从外水体积处开始出峰,并持续进入到内水体积,峰型类似于拖尾,表明F1抗原以较大相对分子质量存在,并呈现不均一的形态,见图3。2.2.2 F1抗原的HPSEC-MALLS分析

【参考文献】：
期刊论文
[1]我国鼠疫流行形势分析及其防治策略探讨[J]. 赵秋芳,尹家祥.  中国热带医学. 2016(07)
[2]鼠疫耶尔森菌F1抗原的性质研究[J]. 王婷,王秉翔.  微生物学免疫学进展. 2012(02)
[3]角度激光光散射仪和体积排阻色谱法联用检测双黄连注射液中的高分子物质[J]. 吴春丽,李攀,马慧艳,李爱星,乔家彬,任常忠.  药物分析杂志. 2011(10)



本文编号：3350542