经白藜芦醇处理的朊病毒感染细胞外泌体中miRNA表达谱的分析

发布时间：2021-09-04 18:17

　　朊病毒病又称为传染性海绵状脑病（transmissible spongiform encephalopathies,TSEs）,是一种侵袭人类和多种动物的神经退行性疾病,致死率100%。其致病机制主要为体内正常的朊蛋白（PrPC）构象发生改变,从而形成具有传染性的阮病毒（PrPsc）。外泌体是细胞向外分泌的一种大小在30-150nm的小囊泡,近年来人们发现外泌体在朊病毒的传播过程中发挥了重要的作用。作为外泌体中重要内容物的miRNA,是一种由18-24个核糖核酸组成的非编码RNA,被证明在朊病毒感染的细胞外泌体中发生异常表达。miRNA可以被选择性的装配到外泌体中,然后随外泌体进入受体细胞并发挥作用。白藜芦醇是一种天然的多酚类的化合物,存在于多种水果或蔬菜中。研究表明白藜芦醇可以有效降低朊病毒感染细胞SMB-S15中PrPSc的含量,但是其机制目前并不清楚。为了探究在白藜芦醇清除SMB-S15细胞PrPSc的过程中,细胞外泌体中的miRNA的变化,我们提取了朊病毒感染的细胞SMB-S15（S15）、白藜芦醇处理4天的SMB-S15细胞（RES4）、白藜芦醇处理8天（RES8）以及经硫酸... 

【文章来源】：中国疾病预防控制中心北京市

【文章页数】：90 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图１．?ＰｒＰ与ＰｒＰＳｅ结构模式图［５］??

制中心?項向外释放出外泌体见图１１９］。研究表明外泌体中含有大量、ＲＮＡ等物质，ＥｘｏＣａｒｔａ数据库的数据表明外泌体中含有种脂质和超过７５４０种ＲＮＡｌｌ（）］。其中蛋白质部分主要包括如ＣＤ６３、ＣＤ８２、热休克蛋白以及ＭＶＢ生成蛋白如凋亡ＬＩＸ），肿瘤易感基因１０１?（ＴＳＧ１０１）。后两者常用于外越多的研究表明，外泌体参与了神经退行性疾病发生发展关的的蛋白质，如朊病毒病中的ＰｒＰＳｅｌｌ２］、阿尔兹海默病Ａ［３）?１１＇帕金森病中的ａ－突触核蛋白（ａ－ｓｙｎ）?［｜４）以及肌萎中的超氧化物气化酶（ＳＯＤ丨）［１５］均＞１］？通过外泌体途径在细种细胞间信息交流与物质交换的市耍媒介，被证明有着非研究表明外泌体吋作为某些疾病１１（０７１包括癌症的生为基因成药物的载体在靶向治疗方面发挥重要的生物学作Ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ?ｓｐａｃｅ?？?．??

蛋白酶Ｋ消化后，进行免疫印迹实验，观察白藜芦醇对细胞中ＰｒＰｓ＜：清除作??用。??由图３我们可以发现：随着白藜芦醇处理时间的延长，细胞中的ＰｒＰＳｅＷ??ＲＥＳ４实验组中便出现下降的趋势，在ＲＥＳ８组中的ＰｒＰＳｅ则完全消失。同时我们??将ＲＥＳ８和ＰＳ组的ＰｒＰ和ＰｒＰｓ＜＾行比较，两组中均检测不到ＰｒＰＳｅ的存在，而??所含的ＰｒＰ含量类似（结果未显）。??１９??


本文编号：3383769