两种遗传性角膜病小鼠模型的建立及其角膜病变特征分析
发布时间：2021-09-05 07:07
乙烷基亚硝基脲（ENU）是一种人工合成的高效烷化剂,能够以较高的效率诱导DNA突变,从而获得大量的人类疾病小鼠模型,用于人类相关疾病的发生、发展机制以及基因功能的研究。本研究利用ENU诱变方法,目前获得7种可遗传的突变小鼠模型,并对其中2种角膜病小鼠模型的角膜组织病变特征进行研究:1 ENU诱变获得两种遗传性角膜病小鼠模型本研究利用ENU腹腔注射15只8-10周龄雄性野生型C57BL/6J（B6）小鼠,待其恢复生殖能力后与野生型B6雌鼠配种繁育。经过初步筛选,共获得36只异常表型小鼠（白斑、瞳孔异位、无眼、角膜混浊等）。通过遗传验证实验,目前确定了7种可遗传的突变小鼠模型。本研究将其中2种角膜病小鼠分别命名为Cod1（Corneal disease 1）、Cod2（Corneal disease 2）,并展开后续工作。2Cod1、Cod2小鼠角膜HE染色分析采用HE染色法分析角膜组织发现:（1）正常小鼠角膜整体结构层次分明,上皮细胞排列整齐,上皮基部平整;角膜基质层中可见平行排列的胶原纤维,不含血管;内皮细胞明显。（2）2周龄Cod1小鼠角膜基质层底部局部胶原纤维松散,部分内皮细胞层缺...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１野生型及ＣＭ／小鼠角膜ＨＥ染色结果（比例尺＝１００?Ｍｍ）??Ｆｉｇ．?２－１?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ｃｏｄ?Ｉ?ｍｉｃｅ?ｃｏｒｎｅａｓ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?ｊａｍ）??注：箭头处为新生血管；三角处为内皮细胞层；星号处为空泡??
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均可表达Ｋ１２；?２周龄ＣｏＷ小鼠角膜上皮细胞Ｋ１２表达明显减弱且局部为阴性，８周龄??小鼠角膜Ｋ１２表达増强与野生型小鼠类似；２周龄Ｃｏ必小鼠局部角膜上皮细胞??Ｋ１２为阴性，８周龄角膜Ｋ１２阳性细胞明显减少且表达变弱（图３－２）。??野生型Ｂ６?Ｃｏｒｆ／小鼠?ＣＷ２小鼠??Ｖ?＼?＼?？?ｔ?；．??Ｖ、Ａ?Ｖ?ｉｆｌ?Ｉｖｖ?＾??２周龄?＼?＼?１??＼?＼?Ｉ??＼＇?＼?１??＼?ｗ??８周龄?＼?，／?，＇：．４??＼?＃?—??图３－２抗Ｋ１２抗体免疫组化结果（比例尺＝１００阿）??Ｆｉｇ．?３－２?Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｕｓｉｎｇ?ａｎｔｉ－Ｋ１２?ａｎｔｉｂｏｄｙ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?｜ｉｍ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于高通量测序数据构建斑马鱼隐性遗传突变筛选系统[J]. 张自冠,施静艺,陈漪,孔杰,陈赛娟,黄金艳. 现代生物医学进展. 2016(09)
[2]眼科学领域发展态势分析[J]. 何明光. 科学观察. 2015(01)
[3]人类疾病动物模型资源数据库的构建[J]. 黄红坤,唐小江,严家荣,武昕,钟志勇,饶子亮,邝少松,黄小红,钟海潮,王刚. 实验动物科学. 2014(04)
[4]鼠胚胎干细胞定向诱导为角膜上皮细胞的实验研究[J]. 杨成明,滕利,黄谙飞. 中国医药导报. 2013(08)
[5]Smad4对小鼠泪腺发育的影响[J]. 刘瑛,顾欣祖,LU Michael,DING Chuan-qing. 中华实验眼科杂志. 2012 (05)
[6]Map3k1调控小鼠眼睑闭合的研究进展[J]. 吴刘成,邵义祥. 动物学杂志. 2011(03)
[7]B6-Co小鼠眼角膜组织观察及血管内皮生长因子的表达[J]. 朱顺星,刘春,缪进,朱蓉嵘,邵义祥. 安徽农业科学. 2010(26)
[8]加强实验技术人员考核 提高实验技术水平[J]. 李红军. 卫生职业教育. 2010(01)
[9]实验动物与公共卫生安全的思考[J]. 姜光瑶,王琦,何学令,巫波,别明江,魏小庆. 现代预防医学. 2010(01)
[10]B6-Co小鼠角膜混浊的细菌学研究[J]. 殷小敏,管怀进,邵义祥. 交通医学. 2008(06)
博士论文
[1]小鼠角膜上皮细胞的长期培养及组织工程化角膜上皮构建[D]. 马小力.中国医科大学 2008
硕士论文
[1]乙烷基亚硝基脲诱变眼睑开放小鼠模型角膜组织学及突变基因研究[D]. 尹依恒.扬州大学 2017
[2]三例眼部突变小鼠的培育、特征分析及一例小眼小鼠突变基因的染色体定位[D]. 李高天.杭州师范大学 2015
[3]角膜混浊小鼠模型获得及其分子基础研究[D]. 倪俊达.扬州大学 2015
[4]可诱导型睾丸特异性启动子Cre工具鼠的建立及HRB2细胞功能研究[D]. 顾卫娟.南京医科大学 2010
[5]用ENU诱导斑马鱼突变和突变体筛选的初步研究[D]. 金鹏.清华大学 2005
本文编号：3384888
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：50 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１野生型及ＣＭ／小鼠角膜ＨＥ染色结果（比例尺＝１００?Ｍｍ）??Ｆｉｇ．?２－１?ＨＥ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｏｆ?ｗｉｌｄ－ｔｙｐｅ?ａｎｄ?Ｃｏｄ?Ｉ?ｍｉｃｅ?ｃｏｒｎｅａｓ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?ｊａｍ）??注：箭头处为新生血管；三角处为内皮细胞层；星号处为空泡??
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均可表达Ｋ１２；?２周龄ＣｏＷ小鼠角膜上皮细胞Ｋ１２表达明显减弱且局部为阴性，８周龄??小鼠角膜Ｋ１２表达増强与野生型小鼠类似；２周龄Ｃｏ必小鼠局部角膜上皮细胞??Ｋ１２为阴性，８周龄角膜Ｋ１２阳性细胞明显减少且表达变弱（图３－２）。??野生型Ｂ６?Ｃｏｒｆ／小鼠?ＣＷ２小鼠??Ｖ?＼?＼?？?ｔ?；．??Ｖ、Ａ?Ｖ?ｉｆｌ?Ｉｖｖ?＾??２周龄?＼?＼?１??＼?＼?Ｉ??＼＇?＼?１??＼?ｗ??８周龄?＼?，／?，＇：．４??＼?＃?—??图３－２抗Ｋ１２抗体免疫组化结果（比例尺＝１００阿）??Ｆｉｇ．?３－２?Ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ?ｓｔａｉｎｉｎｇ?ｕｓｉｎｇ?ａｎｔｉ－Ｋ１２?ａｎｔｉｂｏｄｙ?（Ｓｃａｌｅ?ｂａｒ?＝?１００?｜ｉｍ）??
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于高通量测序数据构建斑马鱼隐性遗传突变筛选系统[J]. 张自冠,施静艺,陈漪,孔杰,陈赛娟,黄金艳. 现代生物医学进展. 2016(09)
[2]眼科学领域发展态势分析[J]. 何明光. 科学观察. 2015(01)
[3]人类疾病动物模型资源数据库的构建[J]. 黄红坤,唐小江,严家荣,武昕,钟志勇,饶子亮,邝少松,黄小红,钟海潮,王刚. 实验动物科学. 2014(04)
[4]鼠胚胎干细胞定向诱导为角膜上皮细胞的实验研究[J]. 杨成明,滕利,黄谙飞. 中国医药导报. 2013(08)
[5]Smad4对小鼠泪腺发育的影响[J]. 刘瑛,顾欣祖,LU Michael,DING Chuan-qing. 中华实验眼科杂志. 2012 (05)
[6]Map3k1调控小鼠眼睑闭合的研究进展[J]. 吴刘成,邵义祥. 动物学杂志. 2011(03)
[7]B6-Co小鼠眼角膜组织观察及血管内皮生长因子的表达[J]. 朱顺星,刘春,缪进,朱蓉嵘,邵义祥. 安徽农业科学. 2010(26)
[8]加强实验技术人员考核 提高实验技术水平[J]. 李红军. 卫生职业教育. 2010(01)
[9]实验动物与公共卫生安全的思考[J]. 姜光瑶,王琦,何学令,巫波,别明江,魏小庆. 现代预防医学. 2010(01)
[10]B6-Co小鼠角膜混浊的细菌学研究[J]. 殷小敏,管怀进,邵义祥. 交通医学. 2008(06)
博士论文
[1]小鼠角膜上皮细胞的长期培养及组织工程化角膜上皮构建[D]. 马小力.中国医科大学 2008
硕士论文
[1]乙烷基亚硝基脲诱变眼睑开放小鼠模型角膜组织学及突变基因研究[D]. 尹依恒.扬州大学 2017
[2]三例眼部突变小鼠的培育、特征分析及一例小眼小鼠突变基因的染色体定位[D]. 李高天.杭州师范大学 2015
[3]角膜混浊小鼠模型获得及其分子基础研究[D]. 倪俊达.扬州大学 2015
[4]可诱导型睾丸特异性启动子Cre工具鼠的建立及HRB2细胞功能研究[D]. 顾卫娟.南京医科大学 2010
[5]用ENU诱导斑马鱼突变和突变体筛选的初步研究[D]. 金鹏.清华大学 2005
本文编号：3384888
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