丙酮酸激酶M2缺失不影响TCRαβ + T细胞的增殖、活化、分化和抗肿瘤能力

发布时间：2021-09-06 20:21

　　为探究丙酮酸激酶M2（pyruvate kinase M2, PKM2）在TCRαβ⁺T细胞中的功能,研究制备了TCRαβ⁺T细胞条件性敲除PKM2小鼠。FACS检测发现PKM2缺失不影响小鼠外周淋巴器官中TCRαβ⁺CD4⁺与CD8⁺T细胞百分比、增殖能力及活化潜能。TCRαβ⁺T细胞特异性PKM2^-/-小鼠可在结肠组织中形成正常的Th1与Th17亚群,也可在体内外诱导产生正常的Th1与Th17。PKM2缺失同样不影响MC38移植瘤生长,也不改变移植瘤中TCRαβ⁺CD4⁺/CD8⁺T细胞比例和T细胞IFN-γ的表达。因而,TCRαβ⁺T细胞特异性PKM2^-/-小鼠具有正常的T细胞功能亚群。Western blotting表明,PKM2^-/-TCRαβ⁺CD4⁺

【文章来源】：现代免疫学. 2020,40(04)北大核心CSCD

【文章页数】：9 页

【部分图文】：

PKM2缺失不影响小鼠外周淋巴结与脾脏中T细胞百分比

PKM2缺失后,T细胞各亚群百分比没有发生变化,而PKM2所参与的糖酵解途径会影响细胞增殖[21],因而,作者推测PKM2缺失可能会影响T细胞的增殖能力。为此,研究进一步分析CD4+与CD8+T细胞、Tconv与Treg Ki-67表达(图2A)。无论是在外周淋巴结(图2B)还是在脾脏(图2C)中,各T细胞亚群Ki-67表达没有统计学差异。再进一步,研究分离小鼠脾脏中CD4+T细胞,使用CTV染料标记并在体外TCR活化条件下检测细胞的增殖情况(图2D)。与PKM2+/+CD4+T细胞相比,无论是否有PKM2激活剂TEPP-46处理,PKM2-/-CD4+T细胞的增殖能力差异没有统计学意义(图2E)。因此,PKM2缺失并不影响T细胞的增殖。2.3 PKM2缺失不影响T细胞的活化

激活TCR后,CD4+与CD8+T细胞都会上调PKM2的表达。因而,作者猜想PKM2缺失可能会影响CD4+与CD8+T细胞的活化潜能。为此,本研究用FACS检测PKM2fl/flCd4-Cre-与PKM2fl/flCd4-Cre+小鼠外周淋巴结与脾脏 CD4+和CD8+T细胞中细胞活化标志分子CD44与CD62L的表达(图3A)。但是,无论是CD4+T细胞(图3B)还是CD8+T细胞(图3C),其CD44-CD62L+、CD44+CD62L+与CD44+CD62L-T细胞百分比没有统计学差异。研究进一步从小鼠脾脏中分离出CD4+T细胞,检测其活化状态在体外随TCR刺激时间增加而产生的变化。结果表明,细胞活化相关分子CD25与CD69在TCR刺激48 h内的任一时间点,CD4+T细胞的活化水平不因PKM2缺失表现出统计学差异。所以,PKM2缺失并不影响T细胞的活化(图3D～3G)。2.4 PKM2缺失不影响CD4+T细胞Th1与Th17亚群产生


本文编号：3388113