表达SDF-1/HOXB4融合基因的间充质干细胞对造血干细胞体外扩增及干性维持的作用

发布时间：2021-09-16 20:00

　　目的构建SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4融合基因腺病毒表达载体,转染体外培养的间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）,比较其对CD34+细胞体外扩增及干性维持的影响。方法全基因合成SDF-1/HOXB4基因序列,以其为模板,经PCR、酶切及测序鉴定,构建表达SDF-1、HOXB4和SDF-1/HOXB4的3种腺病毒载体,转染至293A细胞进行包装和病毒滴度测定,并转染体外培养的MSCs,分别为SDF-1组、HOXB4组和S-H组,转染空腺病毒载体的为阴性对照,转录水平及蛋白水平检测MSCs中外源基因表达。4组MSCs和CD34+细胞共培养7 d,计数细胞并检测其CD34+表达。结果测序表明3种腺病毒载体构建成功,在293A细胞中成功包装并获取病毒,RT-PCR和Western blot检测3个基因在MSCs细胞中稳定高表达,MSCs和CD34+细胞共培养,扩增细胞数目SDF-1组（9.52±2.24）、S-H组（8.11±2.34）显著高于对照组（4.85±2.53,P<0.05）,S-H组（CD34+表达为1.85%）较SDF-1组... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2013,35(07)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

种腺病毒载体SDF-1-IRES-EGFP(A)、HOXB4-IRES-EGFP(B)、SDF-1-(GlySer)

荧光显微镜与倒置显微镜观察3种重组腺病毒转染293A细胞(×100)

流式细胞术检测人MSCs细胞的表型结果

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3397202