L.casei EPS体外促进Balb/c小鼠小肠上皮细胞增殖及其分泌IL-8、IL-10和TGF-β

发布时间：2021-09-25 12:54

　　目的以干酪乳杆菌（Lactobacillus casei,L.casei）胞外多糖（exopolysaccharides,EPS）为研究对象,研究其在体外对Balb/c小鼠小肠上皮细胞（small intestinal epithelial cell,IECs）增殖及其分泌IL-8、IL-10和TGF-β的影响。方法利用嗜热菌蛋白酶消化联合差速贴壁以及免疫细胞化学鉴定的方法对Balb/c小鼠IECs进行分离和鉴定,获得实验用的IECs。用不同质量浓度的L.casei EPS与IECs共培养,分别观察0.5、1、2 h和4 h后IECs的增殖情况。当用不同质量浓度的L.casei EPS处理IECs 2 h后,采用双抗体夹心ELISA法检测细胞培养上清液中细胞因子IL-8、IL-10和TGF-β的质量浓度。结果嗜热菌蛋白酶消化联合差速贴壁的方法能够获得纯度高与活性好的IECs;L.casei EPS能够促进IECs的增殖,显著上调上清液中IL-8、IL-10和TGF-β的分泌水平（P<0.05）,EPS质量浓度在0¹50μg/ml范围内呈剂量依赖关系,并且在1... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2013,29(10)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

倒置显微镜观察IECs形态(×200)

值均随着EPS质量浓度的增加而增大，呈剂量依赖关系，且当EPS质量浓度为150μg/ml时，OD值最大，此时IECs密度最大，增殖最多；而当EPS质量浓度>150μg/ml时，OD值变小，IECs密度下降。因此，150μg/ml是促进IECs增殖的最佳质量浓度。随着培养时间的延长，各质量浓度EPS处理IECs的OD值均为先升高后降低。在0.5~2h的时间a)IECsculturedfor1d;b)IECsculturedfor2d;c)IECsculturedfor4d;d)IECsculturedfor6d.图1倒置显微镜观察IECs形态(×200)Fig1MorphologicfeatureofIECsobservedbyinvertedphasemicroscopy(×200)图2IECs生长曲线Fig2ThegrowthcurveofIECs图3IECs免疫细胞化学鉴定(第6天,200×)Fig3ImmunocytochemistryofIECs(thesixthday,200×)图4EPS与培养时间对IECs增殖的影响Fig4EffectsofEPSconcentrationandculturetimeonproliferationofIECs·837·

赖关系，且当EPS质量浓度为150μg/ml时，OD值最大，此时IECs密度最大，增殖最多；而当EPS质量浓度>150μg/ml时，OD值变小，IECs密度下降。因此，150μg/ml是促进IECs增殖的最佳质量浓度。随着培养时间的延长，各质量浓度EPS处理IECs的OD值均为先升高后降低。在0.5~2h的时间a)IECsculturedfor1d;b)IECsculturedfor2d;c)IECsculturedfor4d;d)IECsculturedfor6d.图1倒置显微镜观察IECs形态(×200)Fig1MorphologicfeatureofIECsobservedbyinvertedphasemicroscopy(×200)图2IECs生长曲线Fig2ThegrowthcurveofIECs图3IECs免疫细胞化学鉴定(第6天,200×)Fig3ImmunocytochemistryofIECs(thesixthday,200×)图4EPS与培养时间对IECs增殖的影响Fig4EffectsofEPSconcentrationandculturetimeonproliferationofIECs·837·


本文编号：3409780