脊髓灰质炎病毒颗粒分离纯化方法学评价

发布时间：2021-10-17 08:14

　　目的比较3种不同密度梯度离心方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。方法选择蔗糖密度梯度离心、氯化铯密度梯度离心、Optiprep（碘克沙醇溶液）密度梯度离心方法,对脊髓灰质炎病毒进行纯化,抽取离心之后的蛋白条带,通过计算蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察,评价其对病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。结果病毒液经蔗糖、氯化铯和Optiprep 3种介质超速离心,均能分离空心颗粒和实心颗粒。氯化铯密度梯度离心法蛋白回收率优于Optiprep及蔗糖密度梯度离心法;Optiprep密度梯度离心法蛋白纯度优于氯化铯及蔗糖密度梯度离心法。结论通过蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察初步评价了3种方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒和实心颗粒的分离效果,为脊髓灰质炎病毒分离纯化提供了参考。 

【文章来源】：中国生物制品学杂志. 2020,33(03)CSCD

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

病毒液经3种介质超速离心分离条带

BCA法检测蛋白含量标准曲线

选择Optiprep密度梯度离心法分离的上、中、下层病毒液进行透射电镜观察，结果显示，上层、中层为不完整的病毒颗粒，即空心颗粒，下层为完整的病毒颗粒，即实心颗粒，且病毒颗粒纯度较高，见图4。图4 Optipre分离后的空心颗粒（A）及实心颗粒（B）的透射电镜观察

【参考文献】：
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本文编号：3441432