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低氧培养对大鼠骨髓间充质干细胞影响的转录组学研究

发布时间:2021-10-18 09:59
  背景间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)具有很强的自我更新和多向分化潜能,能分泌多种生物活性因子,并有免疫调节和营养支持作用。虽然MSCs的许多基本生物学问题尚待明了,研究者们对其用于细胞移植治疗和作为组织工程种子细胞的应用前景倍感兴趣。组织中MSCs的数量极少,无法满足应用所需细胞数。通过体外培养获得干性正常、功能良好的足量MSCs,不论对其基础研究或应用研究,无疑是需要解决的首要问题之一。然而,目前这一问题的解决面临极大的挑战,涉及诸多影响因素。体内和体外两方面研究的进展,使得干细胞培养体系的氧浓度成为人们关注的一个重要因素。其一,各种干细胞的组织微环境氧分压显著低于常规细胞培养体系(18%O2);其二,在常规氧分压培养条件下,MSC存在扩增效率低、DNA受损、易发生细胞衰老和凋亡等问题。近来的不少实验结果提示了低氧对MSC体外培养的有益作用,但是其体外扩增效果距离理想仍相差甚远。还有一些文献报道,低氧培养条件不利于MSC的体外生存和生长。低氧程度、低氧暴露时间和细胞来源不同,是目前对MSC培养效果存在差异和不尽人意的常见解释。... 

【文章来源】:湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】:125 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

低氧培养对大鼠骨髓间充质干细胞影响的转录组学研究


HIF-1在大气氧条件下和在低氧条件下对转录的调节[110]

细胞形态


图 2-1 传代 rBMSC 细胞形态(A)相差显微照片(标尺为 50 μm);(B)瑞氏-吉姆萨染色照片(标尺为 50 μm)Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潜能鉴定成脂诱导培养 rBMSC 21 d 后,油红 O 染色,镜н观察(图 2-2 A):脂滴染色呈红色,数目多,щ脂滴大,说明细胞已成功分化为脂肪细胞。成骨诱导培养 rBMSC 21d 后,茜素红染色,镜н观察(图 2-2 B):已失去原有细胞形态特征,大部分呈鲜红色,证实有钙结节。成软骨诱导培养 rBMSC 21d 后,所得细胞团有 定硬度,石蜡包埋切片,阿利新蓝染色,镜н观察(图 2-2 C):整个细胞团块被染成蓝绿色,细胞团紧致,边缘齐整清晰,着色较深。

三向,实验结果,细胞团,脂滴


图 2-1 传代 rBMSC 细胞形态(A)相差显微照片(标尺为 50 μm);(B)瑞氏-吉姆萨染色照片(标尺为 50 μm)Fig.2-1 The morphology of passaged rBMSC.(A) A microphotograph of the rBMSC under an inverted phase-contrast microscope (Scale bar,50 μm); (B) A microphotograph of the Wright-Giemsa stained BMSC (Scale bar, 50 μm)2.4.1.2 三向分化潜能鉴定成脂诱导培养 rBMSC 21 d 后,油红 O 染色,镜н观察(图 2-2 A):脂滴染色呈红色,数目多,щ脂滴大,说明细胞已成功分化为脂肪细胞。成骨诱导培养 rBMSC 21d 后,茜素红染色,镜н观察(图 2-2 B):已失去原有细胞形态特征,大部分呈鲜红色,证实有钙结节。成软骨诱导培养 rBMSC 21d 后,所得细胞团有 定硬度,石蜡包埋切片,阿利新蓝染色,镜н观察(图 2-2 C):整个细胞团块被染成蓝绿色,细胞团紧致,边缘齐整清晰,着色较深。

【参考文献】:
期刊论文
[1]识别多种种属来源间充质干细胞核酸适配体的筛选及鉴定[J]. 郭晓华,李章华,汪伟,董洁,丁红梅,李少华,邵宁生.  军事医学. 2017(03)
[2]低氧预处理骨髓间充质干细胞耐受缺血缺氧的能力[J]. 徐巧岩,夏琳,王吉昌.  中国组织工程研究. 2013(49)
[3]大鼠骨髓MSCs表面分子检测及诱导分化研究[J]. 王刚,吕同德,马静,常雅萍.  中国实验诊断学. 2008(01)

博士论文
[1]低氧微环境对骨髓间充质干细胞成骨分化影响的研究[D]. 黄姣.重庆医科大学 2012

硕士论文
[1]低氧培养对大鼠骨髓间充质干细胞增殖的影响[D]. 熊蕾.湖南师范大学 2016
[2]低氧对人骨髓间充质干细胞增殖及血红素加氧酶-1表达的的影响[D]. 宋玮玮.兰州大学 2010



本文编号:3442615

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